HiMedia M1076-100G Основа MIU среды

Основа MIU среды HiMedia M1076-100G — сухая питательная среда для одновременного определения подвижности, активности уреазы и продукции индола. Применяется для идентификации изолированных микроорганизмов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Среда MIU (Motility-Indole-Urease) разработана для комплексного анализа трех свойств микроорганизма в одной пробирке:

1. Подвижность: подвижные организмы демонстрируют диффузный рост или помутнение, распространяющееся от линии посева; неподвижные растут строго вдоль линии укола.
2. Активность уреазы: организмы, использующие мочевину, вырабатывают аммиак, который защелачивает среду. Индикатор феноловый красный меняет цвет на розово-красный.
3. Продукция индола: индол образуется из триптофана, содержащегося в триптоне. При добавлении реагента Ковакса индол вступает в реакцию с альдегидом, образуя красное кольцо на поверхности среды.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH конечного раствора (при 25 °C): 6,8 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 18 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по 95 мл в колбы и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50–55 °C.
5. В асептических условиях добавьте по 5 мл стерильного 40 % раствора мочевины (артикул FD048) на каждые 95 мл базовой среды.
6. Тщательно перемешайте, разлейте в стерильные пробирки и дайте застыть в вертикальном положении.

Процедура анализа

1. Выполните укольный посев исследуемого микроорганизма в толщу среды.
2. Инкубируйте пробирки при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.
3. Сначала оцените результаты на подвижность и активность уреазы.
4. Для определения продукции индола добавьте реагент Ковакса.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-оранжевого до светло-розового цвета.
• Желирование: полутвердое, сопоставимо с 0,2 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды (после добавления мочевины): желто-оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Результаты получены с использованием 40 % раствора мочевины (FD048) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязненные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.