Цитратный агар с дезоксихолатом натрия, модифицированнный HiMedia M1074-500G (уп/500 гр)

Селективная питательная среда «Цитратный агар с дезоксихолатом натрия, модифицированнный HiMedia M1074-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia предназначена для выделения Salmonella и Shigella. Среда применяется при микробиологическом исследовании пищевых продуктов, подавляет рост колиформных и грамположительных бактерий и дифференцирует лактозоферментирующие и нелактозоферментирующие энтеробактерии по цвету колоний.

Назначение

Цитратный агар с дезоксихолатом натрия, модифицированный по Hynes, — селективная дифференциальная среда для выделения и идентификации видов Salmonella и Shigella. Основной тип исследуемых образцов — пищевые продукты.

Технические характеристики

• Наименование: Deoxycholate Citrate Agar, Modified (Hynes)
• Артикул: M1074-500G
• Форма выпуска: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Происхождение компонентов: животное
• Масса упаковки: 500 г
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Рабочая концентрация для приготовления: 51,92 г/л
• Условия инкубации при контроле культуральных характеристик: 35–37 °C, 18–24 ч

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

HM-пептон эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 51,92 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве и не перегревайте среду.
4. Избыточный нагрев повреждает среду и ухудшает её рабочие характеристики.

Стерилизация в автоклаве приводит к размягчению агара; после автоклавирования среда становится мягкой и практически непригодной для посева штрихом.

Принцип действия и интерпретация

Среда представляет собой модифицированный Hynes вариант цитратного агара с дезоксихолатом натрия. Основу селективности составляют ингибирующие вещества — цитраты и дезоксихолат натрия; в модифицированной среде концентрации ингибиторов повышены. Среда применяется, в том числе, в пищевой микробиологии.

Пептон и HM-пептон обеспечивают микроорганизмы источниками углерода, азота, аминокислот с длинной цепью, витаминов и минеральных веществ.

Дезоксихолат натрия, цитрат натрия и цитрат железа ингибируют или значительно подавляют колиформные и грамположительные бактерии.

Лактоза обеспечивает дифференциацию энтеробактерий:

• лактозоферментирующие микроорганизмы образуют красные колонии;
• нелактозоферментирующие микроорганизмы образуют бесцветные колонии;
• присутствующие колиформные бактерии формируют на среде розовые колонии.

Разложение лактозы вызывает подкисление среды вокруг соответствующих колоний. Под воздействием изменения pH индикатор нейтральный красный изменяет цвет на красный. Такие колонии обычно окружены мутной зоной осаждённой дезоксихолевой кислоты, образующейся вследствие подкисления среды.

В кислой среде дезоксихолат натрия соединяется с нейтральным красным, из-за чего краситель выходит из раствора с последующим осаждением дезоксихолата.

Восстановление тиосульфата натрия до сульфида выявляется по образованию чёрного сульфида железа.

Виды Salmonella и Shigella не ферментируют лактозу. Salmonella может образовывать H₂S, вследствие чего формируются бесцветные колонии с чёрным центром или без него.

Сочетание цитрата и железа оказывает выраженное гидролизующее воздействие на агар при нагревании, в результате чего образуется мягкий и неэластичный гель. Поэтому среду нельзя автоклавировать.

Поверхностные колонии нелактозоферментирующих микроорганизмов иногда поглощают небольшое количество красителя из среды и приобретают розоватый оттенок; такие колонии можно ошибочно принять за колонии колиформных бактерий.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция 5,19%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,10–7,50.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными методическими руководствами.

Материалы, загрязнённые после использования, необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Условия хранения: сухое, проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить в сухом виде с плотно закрытой крышкой.
• После каждого использования: плотно закрывать контейнер.

Продукт обладает гигроскопичностью. При ненадлежащем хранении возможно образование комков. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении условий хранения, рекомендованных для продукта.

Ограничения применения

• Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
• Не допускается избыточный нагрев, поскольку он повреждает среду.
• Автоклавирование не допускается: агар становится мягким и практически непригодным для пос