HiMedia M1074-100G Модифицированный дезоксихолат-цитратный агар

HiMedia·Арт.: 0049094·Арт. произв.: M1074-100G

HiMedia M1074-100G Модифицированный дезоксихолат-цитратный агар

Name: HiMedia M1074-100G Модифицированный дезоксихолат-цитратный агар
Brand: HiMedia
SKU: 0049094
Price: 5225 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ5 225 руб.

Селективная питательная среда HiMedia M1074-100G Модифицированный дезоксихолат-цитратный агар предназначена для выделения Salmonella и Shigella из пищевых образцов. Среда используется для дифференциации энтеробактерий по ферментации лактозы и образованию H₂S, при этом избыточный нагрев и автоклавирование не допускаются.

Описание

Назначение

Рекомендуемое назначение — селективное выделение видов Salmonella и Shigella из пищевых образцов. Среда также применяется для дифференциальной идентификации энтеробактерий по ферментации лактозы и образованию сернистого железа.

Состав

Состав на 1 л:

Компонент	г/л
Пептон	5,000
Пептон HM, эквивалент мясного экстракта	5,000
Лактоза	10,000
Цитрат натрия	8,500
Цитрат железа	1,000
Дезоксихолат натрия	5,000
Тиосульфат натрия	5,400
Нейтральный красный	0,020
Агар	12,000

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный дезоксихолат-цитратный агар по Хайнсу представляет собой селективную дифференциальную среду для выделения Salmonella и Shigella. Дезоксихолатный агар первоначально был разработан Лейфсоном как дифференциальная среда на основе чистых химических компонентов, цитратов и дезоксихолата, выполняющих ингибирующую функцию. Позднее состав среды неоднократно модифицировался различными авторами. Вариант, модифицированный Хайнсом, содержит повышенные концентрации ингибирующих компонентов и используется в пищевой микробиологии.

Пептон и пептон HM обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и минеральными веществами.
Дезоксихолат натрия, цитрат натрия и цитрат железа ингибируют или значительно подавляют рост колиформных и грамположительных бактерий.
Лактоза используется для дифференциации энтеробактерий: ферментирующие лактозу микроорганизмы образуют красные колонии, а неферментирующие лактозу — бесцветные.
Колиформные бактерии при наличии на среде образуют розовые колонии. Расщепление лактозы приводит к подкислению среды вокруг соответствующих колоний, вследствие чего индикатор pH нейтральный красный изменяет цвет на красный.
Такие колонии обычно окружены мутной зоной осаждённой дезоксихолевой кислоты, образующейся вследствие подкисления среды.
В кислой среде дезоксихолат натрия соединяется с нейтральным красным, в результате чего краситель выходит из раствора и одновременно осаждается дезоксихолат.
Восстановление тиосульфата натрия до сульфида выявляется по образованию чёрного сульфида железа.
Виды Salmonella и Shigella не ферментируют лактозу. Salmonella может образовывать H₂S, формируя бесцветные колонии с чёрными центрами или без них.
Сочетание цитрата и железа оказывает выраженное гидролизующее действие на агар при нагревании, в результате чего образуется мягкий и неэластичный гель.
При автоклавировании агар становится мягким и практически непригодным для посева штрихом.
Поверхностные колонии неферментирующих лактозу микроорганизмов часто впитывают небольшое количество красителя из среды и приобретают розоватый оттенок, из-за чего могут быть ошибочно приняты за колонии колиформных бактерий.

Методика приготовления среды

Суспендируйте 51,92 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
Не автоклавируйте и не перегревайте среду. Избыточный нагрев ухудшает её свойства и может привести к образованию чрезмерно мягкого геля.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Тип образца: пищевые продукты.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным методическим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Назначение изделия: агар, сухая питательная среда
Форма выпуска: порошок
Масса: 100 г
Тип продукта: стандартный
Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
Происхождение компонентов: животное
Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
Диапазон pH: 7,10–7,50
Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция 5,19%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии	H₂S
Bacillus cereus ATCC 10876	≥10⁴	подавлен	0 %
Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)	50–100	слабый–умеренный	20–30 %	красный	отрицательная реакция
Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*)	50–100	хороший–обильный	≥50 %	бесцветный	положительная реакция, колонии с чёрным центром
Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*)	50–100	хороший–обильный	≥50 %	бесцветный	положительная реакция, колонии с чёрным центром
Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*)	50–100	хороший–обильный	≥50 %	бесцветный	отрицательная реакция
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 (00097*)	50–100	хороший–обильный	≥50 %	светло-розовый	отрицательная реакция
Shigella sonnei ATCC 25931	50–100	хороший–обильный	≥50 %	розовый, с осадком желчи	отрицательная реакция
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)	≥10⁴	подавлен	0 %

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой упаковке. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия тщательно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Эффективность продукта обеспечивается при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
Не допускайте избыточного нагрева, поскольку он оказывает неблагоприятное воздействие на среду.
Автоклавирование не допускается: после автоклавирования агар становится мягким и практически непригодным для посева штрихом.
Поверхностные колонии неферментирующих лактозу микроорганизмов могут приобретать розоватый оттенок из-за поглощения красителя из среды и быть ошибочно приняты за колиформные бактерии.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы и стандартные меры предосторожности, установленные для обращения с образцами. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов и материалов, контактировавших с образцом, соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры: материалы должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.