HiMedia M1073-100G Основа GBS среды

Основа питательной среды HiMedia M1073-100G GBS для быстрого обнаружения стрептококков группы B в клинических образцах. Применяется для выделения Streptococcus agalactiae из вагинальных и ректальных мазков; конечный pH среды составляет 7,5 ± 0,2.

Принцип измерения

Среда GBS разработана для использования способности большинства стрептококков группы B (GBS) вырабатывать оранжево-красный пигмент (каротиноид) при инкубации в анаэробных условиях.

Компоненты среды обеспечивают следующие функции:

• Протеозопептон: источник необходимых питательных веществ для роста GBS.
• Фосфатные соли: поддерживают стабильный pH (буферизация).
• Антибиотическая добавка (FD054): обеспечивает селективность среды для стрептококков группы B.
• Сыворотка лошади инаяктивированная: обогащает среду для стимуляции роста.

Колонии Streptococcus agalactiae диаметром 0,5–1 мм имеют округлую форму и приобретают оранжево-красную пигментацию через 24–48 часов анаэробной инкубации. Другие микроорганизмы, способные расти на данной среде, не вырабатывают этот пигмент. Среда также поддерживает рост других бактерий генитального тракта, вызывающих перинатальные инфекции, таких как анаэробные Streptococcus, Bacteroides и виды Clostridium.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 55,12 г основы в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Полностью растворить содержимое, осторожно нагревая до кипения в течение 15–20 минут.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 60 °C.
5. В асептических условиях добавить 25 мл стерильной инактивированной сыворотки лошади (RM1239) и стерильное разведенное содержимое 1 флакона добавки GBS Supplement (FD054).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам.
7. Для формирования геля пробирки необходимо выдержать в холодильнике при температуре 2–8 °C в течение ночи перед использованием.

Процедура анализа

1. Вагинальные или ректальные мазки следует вводить в среду вертикально.
2. Инкубировать образцы при температуре 35–37 °C.
3. Контролировать появление пигмента с интервалом в один час.
4. Изменение цвета (из-за выработки пигмента) в столбике среды происходит постепенно: от дна пробирки к верхнему краю.

Ограничение: Наличие крови в образце может привести к ложноположительным результатам. Предварительно положительные результаты должны быть подтверждены биохимическим анализом для идентификации GBS.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый или желтый, слегка опалесцирующий раствор с осадком крахмала на дне пробирки
• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от кремового до бежевого цвета
• Значение pH (при 25 °C): 7,30–7,70 (номинал 7,5 ± 0,2)
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении инактивированной сыворотки лошади (RM1239) и добавки GBS Supplement (FD054) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

* — соответствующие номера WDCM

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения основы: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.