HiMedia M1064I-500G Основа агара для идентификации листерий (PALC)

Основа агара для идентификации листерий (PALC) HiMedia M1064I-500G предназначена для выделения и подсчета Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов для животных. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 11290-2:1998.

Принцип измерения

Среда PALCAM (Polymyxin Acriflavine Lithium Chloride Ceftazidime Esculin Mannitol) является высокоселективной благодаря содержанию хлорида лития, акрифлавина гидрохлорида, цефтазидима и полимиксина B.

В среде используются две индикаторные системы:

1. Эскулин — цитрат аммония железа (III): Listeria monocytogenes гидролизует эскулин до эскулетина. Эскулетин взаимодействует с цитратом аммония железа (III), образуя коричнево-черный комплекс, который проявляется в виде черного ореола вокруг колоний.
2. Маннит — феноловый красный: используется для дифференциации. Контаминанты, такие как стафилококки (Staphylococci), ферментируют маннит, что вызывает изменение цвета среды с красного на желтый.

Декстроза и крахмал служат источниками энергии. Инкубация в микроаэрофильных условиях подавляет рост строгих аэробов, таких как виды Bacillus и Pseudomonas.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 34,44 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое одного флакона селективной добавки PALCAM (FD061).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура посева и интерпретация

В зависимости от типа образца перед посевом на агар PALCAM проводится селективное обогащение:

• Для молочных продуктов: используется селективная обогатительная среда для Listeria.
• Для мясных и птичьих продуктов: используются селективная обогатительная среда для Listeria UVM (M890) или вторичный обогатительный бульон Фрейзера (M1083).

Результаты инкубации:

• Через 24 часа: колонии Listeria серо-зеленого или оливкового цвета, диаметром 1,5–2 мм, с черным ореолом и обычно с черным центром.
• Через 48 часов: серо-зеленые колонии диаметром около 2 мм с черным ореолом и черным вогнутым центром.

Технические характеристики

Состав основы (M1064I), г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2.

Селективная добавка (FD061-PALCAM), концентрация:

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены в микроаэрофильных условиях с добавлением селективной добавки PALCAM (FD061) после инкубации при 35–37 °C в течение 48 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Для подтверждения результатов требуется дальнейшая биохимическая идентификация организмов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.

Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.