HiMedia M1064I-500G Основа агара для идентификации листерий (PALC)

Порошкообразная основа агара HiMedia M1064I-500G для идентификации листерий (PALCAM), производитель HiMedia, масса 500 г. Предназначена для обнаружения и количественного определения Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных; для подтверждения идентификации требуется дополнительное биохимическое исследование.

Назначение

Основа агара HiMedia M1064I-500G применяется для приготовления селективной среды PALCAM при обнаружении и количественном определении Listeria monocytogenes в пищевых продуктах, молочных образцах и кормах для животных.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11290-2:1998. Для отдельных типов образцов перед посевом на агар PALCAM выполняют селективное обогащение.

Состав

Основа агара для идентификации листерий PALCAM

Состав на 1 л среды:

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Селективная добавка PALCAM FD061

Добавляется после автоклавирования основы:

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 34,44 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки PALCAM FD061.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар для идентификации листерий также известен как агар PALCAM — среда на основе полимиксина, акрифлавина, хлорида лития, цефтазидима, эскулина и маннита. Среда была разработана для выявления Listeria, а Международная организация по стандартизации рекомендовала её модификацию для обнаружения и количественного определения Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных.

• Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами.
• Высокую селективность среды обеспечивают хлорид лития, гидрохлорид акрифлавина, цефтазидим и полимиксин B.
• В среде используются две индикаторные системы: эскулин — цитрат аммония и железа, а также маннит — феноловый красный.
• Listeria monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина и декстрозу. Эскулетин реагирует с цитратом аммония и железа с образованием коричнево-чёрного комплекса, который проявляется в виде чёрного ореола вокруг колоний.
• Декстроза и крахмал служат источниками энергии.
• Контаминирующие микроорганизмы, такие как Staphylococci, ферментируют маннит; это сопровождается изменением цвета среды с красного на жёлтый и облегчает дифференциацию.
• Инкубация в микроаэрофильных условиях подавляет строгих аэробов, включая виды Bacillus и Pseudomonas.

Селективное обогащение образцов

В зависимости от типа образца перед инокуляцией на агар PALCAM проводят селективное обогащение:

• для молочных продуктов обычно используют селективную среду обогащения Listeria;
• для мясных продуктов и продукции из мяса птицы используют селективную среду обогащения Listeria UVM (M890) и бульон вторичного обогащения Fraser (M1083).

Культуральные характеристики

После 24 ч инкубации колонии видов Listeria имеют серо-зелёную или оливковую окраску, диаметр 1,5–2 мм и чёрный ореол; обычно колонии имеют чёрный центр.

После 48 ч инкубации наблюдаются серо-зелёные колонии диаметром около 2 мм с чёрным ореолом и чёрным вдавленным центром.

Культуральные характеристики определяют в микроаэрофильных условиях на среде с добавленной селективной добавкой PALCAM FD061 после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Тип образца

Тип образца: пищевые продукты и молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для