Агар для идентификации листерий HiMedia M1064-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Агар для идентификации листерий HiMedia M1064-500G (уп/500 гр) — производство HiMedia, агаровая основа PALCAM для селективного выделения и идентификации листерий. Применяется для анализа клинических и не клинических образцов, а для приготовления среды требуется селективная добавка для листерий PALCAM FD061.

Назначение и область применения

Агар HiMedia M1064-500G Listeria Identification Agar Base (PALCAM) предназначен для селективного выделения и идентификации видов Listeria из клинических и не клинических образцов.

• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: агаровая основа
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011
• Происхождение: животное

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии, биологические жидкости
• Пищевые образцы
• Образцы воды

Состав

Формула среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• pH: 6,80–7,20
• Реакция: водный раствор с массово-объёмной концентрацией 6,9 % при 25 °C; pH 7,0 ± 0,2

Принцип измерения и интерпретация

Род Listeria включает Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Listeria seeligeri, Listeria welshimerii, Listeria innocua, Listeria grayi, Listeria murrayi и Listeria denitrificans. L. monocytogenes и L. ivanovii связаны с заболеваниями человека. Патогенность L. ivanovii остаётся неопределённой.

L. monocytogenes встречается в различных средах обитания, включая нормальную микрофлору здоровых жвачных животных, желудочно-кишечный тракт людей без симптомов заболевания, а также природные и антропогенные источники: речную воду, сточные воды, почву, силос, удобрения и разлагающуюся растительность.

Агар для идентификации листерий также известен как агар PALCAM — полимиксин-акрифлавин-хлорид лития-цефтазидим-эскулин-маннитол. Среда разработана Van Netten и соавторами и рекомендована для выделения L. monocytogenes из пищевых продуктов.

Селективность среды PALCAM обеспечивается наличием хлорида лития, цефтазидима, полимиксина B и гидрохлорида акрифлавина. Среда PALCAM является дифференциально-диагностической и использует две индикаторные системы:

• эскулин и цитрат железа;
• маннитол и феноловый красный.

Функции компонентов среды:

• Пептон служит источником углерода, азотистых веществ, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и необходимых для роста питательных веществ.
• Декстроза (глюкоза), крахмал и маннитол являются источниками углеводов и энергии.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.
• Феноловый красный является индикаторным красителем pH и изменяет окраску при изменении кислотности среды.
• L. monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина и декстрозы.
• Эскулетин реагирует с цитратом аммонийного железа с образованием коричнево-чёрного комплекса, видимого в виде чёрного ореола вокруг колоний.
• L. monocytogenes не ферментирует маннитол.
• Контаминирующие микроорганизмы, включая энтерококки и стафилококки, ферментируют маннитол; это проявляется изменением цвета среды с красного на жёлтый.
• В микроаэрофильных условиях подавляется рост строгих аэробов, таких как виды Bacillus и Pseudomonas.

Добавление яичного желтка в концентрации 2,5 % об./об. к агару PALCAM может способствовать восстановлению повреждённых клеток. Среда с добавлением крови, нанесённая поверх агара PALCAM, позволяет дифференцировать и количественно учитывать гемолитические виды Listeria.

В зависимости от типа образца перед посевом на агар PALCAM следует использовать бульон для селективного обогащения. Для молочных продуктов обычно применяют среду для селективного обогащения листерий; для мяса и продуктов из птицы — среду для селективного обогащения листерий UVM (M890A) и бульон для вторичного обогащения Fraser (M1083).

После посева и инкубации при 35 °C в течение 24–48 ч в аэробных или микроаэрофильных условиях колонии Listeria на агаре PALCAM имеют серо-зелёную окраску и чёрный осадок.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 34,44 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки для листерий PALCAM FD061.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Условия инкубации и культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в микроаэрофильных условиях с добавлением селективной добавки для листерий PALCAM FD061 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Требования к сбору и обращению с образцами

1. Для клинических образцов применяйте соответствующие методы