HiMedia M1064-100G Основа агара для идентификации листерий

Основа агара для идентификации листерий HiMedia M1064-100G (PALCAM) предназначена для селективного выделения и идентификации видов Listeria из клинических и неклинических образцов. Среда обладает высокой селективностью благодаря содержанию хлорида лития, цефтазидима, полимиксина B и гидрохлорида акрифлавина.

Принцип измерения и интерпретация

Среда PALCAM (Polymyxin-Acriflavin-Lithium chloride-Ceftazidime-Aesculin-Mannitol) является дифференциально-диагностической и использует две индикаторные системы: эскулин с цитратом железа и маннит с феноловым красным.

• Питательные компоненты: Пептон обеспечивает организм углеродом, азотом, длинноцепочечными аминокислотами и витаминами. Декстроза (глюкоза), крахмал и маннит служат источниками энергии. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
• Индикация: Феноловый красный служит индикатором pH. L. monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина и декстрозу. Эскулетин взаимодействует с цитратом аммония и железа, образуя коричнево-черный комплекс, который проявляется в виде черного ореола вокруг колоний.
• Дифференциация: L. monocytogenes не ферментирует маннит. Загрязняющие микроорганизмы, такие как энтерококки и стафилококки, ферментируют маннит, что вызывает изменение цвета среды с красного на желтый.
• Селективность: В микроаэрофильных условиях подавляется рост строгих аэробов, таких как виды Bacillus и Pseudomonas.

При инокуляции и инкубации при 35 °C в течение 24–48 часов (в аэробных или микроаэрофильных условиях) колонии Listeria выглядят серо-зелеными с черным осадком.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 34,44 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое 1 флакона регидратированной добавки PALCAM Selective Supplement (FD061).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Клинические образцы: фекалии, биологические жидкости.
• Пищевые образцы: продукты питания.
• Пробы воды.

Перед посевом на агар PALCAM рекомендуется использовать селективные бульоны для обогащения:

• Для молочных продуктов: Listeria Selective Enrichment Medium.
• Для мяса и птицы: Listeria Selective Enrichment Medium UVM (M890A) или вторичный бульон Фрейзера (M1083).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в микроаэрофильных условиях с добавлением селективной добавки PALCAM (FD061) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков.

Ограничения применения

1. Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
2. Среда не является окончательно дифференцирующей; для точной идентификации между различными видами Listeria требуется дополнительное биохимическое тестирование.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.