М 17 агар с глицерофосфатом HiMedia M1063-100G (уп/100 гр)

Сухая питательная среда М 17 агар с глицерофосфатом HiMedia M1063-100G (уп/100 г) предназначена для культивирования молочнокислых стрептококков и проведения анализа бляшек молочнокислых бактериофагов. Применяется для селективного подсчета Streptococcus thermophilus в йогуртах, а также для выращивания и поддержания стартовых культур при производстве сыра и йогурта.

Принцип измерения и интерпретация

Среда M17 основана на рецептуре Terzaghi и Sandine для культивирования и количественного учета молочнокислых стрептококков и их бактериофагов. Среда позволяет изучать морфологию бляшек и лизогению. Рекомендована Международной федерацией по молоку (IDF) и Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA).

Молочнокислые стрептококки являются трофобиотически требовательными организмами. Динатрий-β-глицерофосфат поддерживает уровень pH выше 5,7, что критически важно, так как более низкое значение pH приводит к повреждению клеток и снижению выхода микроорганизмов. Кроме того, глицерофосфат не образует осадка с кальцием, что необходимо для анализа бляшек бактериофагов.

Компоненты среды:

• Соевый пептон, дрожжевой экстракт, HM пептон B и биопептон: обеспечивают углеродные и азотистые соединения, витамины группы B и другие факторы роста.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Аскорбиновая кислота: стимулирует рост молочнокислых стрептококков.
• Сульфат магния: источник необходимых ионов.
• Динатрий-β-глицерофосфат: стабилизирует pH и подавляет рост Lactobacillus bulgaricus.

Среда также позволяет выявлять мутантные штаммы стрептококков, не ферментирующие лактозу.

Область применения

• Анализ молочных проб.
• Контроль качества йогуртов и сыров.
• Выделение и подсчет Streptococcus thermophilus.
• Исследование бактериофагов молочнокислых бактерий.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 52,25 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Посев и инкубация

Рекомендуемый метод подсчета стрептококков — посев массой или методом «штыкования» (внесение в агар, расплавленный и охлажденный до 50–55 °C).

• Инкубация: 42 °C в течение 24 часов.
• Оценка результатов:
  • Лактозоположительные колонии стрептококков становятся видимыми через 15 часов; через 5 дней их диаметр достигает 3–4 мм.
  • Лактозоотрицательные колонии имеют диаметр около 1 мм.
  • Присутствие бактериофагов определяется по появлению характерных бляшек на фоне бактериального роста.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,1 $\pm$ 0,2.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый, слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,1 $\pm$ 0,2 (для 5,23% в/в водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической работы в лаборатории.
• Утилизация: все загрязненные материалы и остатки среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.