Основа сульфатазного агара Вэйна для дифференциации микобактерий HiMedia M1059-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Основа сульфатазного агара Вэйна для дифференциации микобактерий HiMedia M1059-500G (уп/500 гр). Применяется для биохимического дифференцирования видов Mycobacteria на основании их способности вырабатывать арилсульфатазу.

Принцип измерения

Определение основано на способности некоторых видов микобактерий вырабатывать фермент арилсульфатазу. Данный фермент воздействует на компонент субстрата — трикалийфенолфталеинсульфат, что приводит к высвобождению свободного фенолфталеина. После добавления реагента карбоната натрия (Na₂CO₃) в среду происходит изменение цвета на красный, что свидетельствует о положительной реакции.

Метод позволяет дифференцировать быстрорастущие виды, такие как Mycobacterium fortuitum, от нефотохромогенных микобактерий группы III. Некоторые медленнорастущие виды не вырабатывают достаточного количества фермента для получения стабильно положительного результата.

Область применения

Среда используется для анализа клинических образцов (мокроты). Быстрорастущие и медленнорастущие виды Mycobacterium дифференцируют на основании результатов теста через 3 дня или 2 недели соответственно.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: 20,71 г порошка суспендируют в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Растворение: Нагревают до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизация: Разливают по пробиркам и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,07 МПа) в течение 15 минут.
4. Охлаждение: Пробирки охлаждают в вертикальном положении.
5. Инкубация: Посевают образец и инкубируют в течение 3–14 дней.
6. Проявление результата: После инкубации в каждую пробирку добавляют 0,5–1,0 мл 2N раствора Na₂CO₃.
7. Оценка: Изменение цвета среды на красный оценивают в течение 30 минут после добавления реагента.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2
• Тип среды: Дифференциальный
• Назначение: Основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Происхождение компонентов: Животное
• Физическая форма: Порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: в пробирках образуется желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (столбик).
• Реакция: pH 2,07% водного раствора при 25 °C составляет 7,0 ± 0,2 (диапазон 6,80–7,20).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 3 дней (для Mycobacterium tuberculosis — 2 недели).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
• Требования к помещению: сухое вентилируемое место, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности и ограничения

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе с образцами использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Ограничение: для получения достоверных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.
• Утилизация: использованные или непригодные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.