Основа сульфатазного агара Вэйна для дифференциации микобактерий HiMedia M1059-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Основа сульфатазного агара Вэйна для дифференциации микобактерий HiMedia M1059-500G (уп/500 гр) предназначена для биохимического различения Mycobacteria по способности продуцировать арилсульфатазу. Основа применяется для анализа клинических образцов мокроты, а оценка реакции выполняется через 3–14 суток инкубации с использованием раствора карбоната натрия.

Назначение

Основа сульфатазного агара Вэйна предназначена для биохимической дифференциации Mycobacteria по способности продуцировать арилсульфатазу.

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: основа
• Тип образца: клинические образцы, мокрота
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечное значение pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Приготовление среды и стерилизация

1. Суспендируйте 20,71 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Принцип измерения и интерпретация

Mycobacteria традиционно рассматриваются как отдельная группа бактерий в большинстве клинических лабораторий из-за ряда отличительных характеристик. Большинство штаммов растёт медленно; продолжительность удвоения численности составляет от 2 до 22 ч. Поэтому необходимо длительное поддержание оптимальных условий культивирования и устранение из образцов более быстро растущих бактериальных загрязнителей.

Определение активности фермента арилсульфатазы у Mycobacteria помогает идентифицировать отдельные виды, в частности дифференцировать быстрорастущие Mycobacteria fortuitum от нефотохромогенных Mycobacteria группы III. Некоторые медленно растущие виды не продуцируют достаточное количество фермента, поэтому не обеспечивают стабильно положительную реакцию.

Некоторые виды Mycobacteria продуцируют арилсульфатазу — фермент, атакующий субстрат, то есть трифенолфталеинсульфат калия. В результате высвобождается свободный фенолфталеин, наличие которого определяется по изменению цвета среды на красный после добавления реагента — гидрокарбоната натрия.

Проведение теста на сульфатазу

Основа сульфатазного агара Вэйна разработана Wayne для распознавания M. fortuitum с использованием трёхдневного теста на фенолфталеинсульфатазу.

• Быстрорастущие и медленно растущие виды Mycobacterium дифференцируют соответственно по трёхдневному тесту и тесту продолжительностью 2 недели.
• После инкубации в течение 3–14 суток добавьте в каждую пробирку 0,5–1,0 мл 2N раствора Na₂CO₃.
• Оцените изменение цвета в течение 30 мин после добавления раствора.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Реакция

• Условия определения: реакция водного раствора с концентрацией 2,07 % масс./об. при 25 °C
• pH: 7,0 ± 0,2

Диапазон pH

6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 3 суток; Mycobacterium tuberculosis инкубируют в течение 2 недель.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого продукта: при температуре ниже 10–30 °C, в плотно закрытой упаковке
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрыв флакон
• Дополнительные условия: хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения
• Защита от влаги: плотно закрывать контейнер после использования для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке
• Рабочие характеристики: рекомендуется использовать продукт в течение установленного срока годности; несоблюдение условий хранения может привести к образованию комков

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для предотвращения ошибочных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, являющиеся инфекционными или контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками и установленными процедурами обращения с инфекционными материалами.