Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным с МУГ HiMedia M1058-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным с МУГ HiMedia M1058-500G (уп/500 гр) представляет собой порошковый агар с конечным pH 7,4 ± 0,2. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения колиформных микроорганизмов флуорогенным методом, а приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Среда рекомендуется для обнаружения и количественного определения колиформных микроорганизмов флуорогенным методом.

Типы образцов

• Пищевые продукты и молочные образцы.
• Образцы воды.

Для пищевых и молочных образцов следует применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. Для образцов воды необходимо использовать соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом руководств и местных стандартов.

Состав

Состав на 1 л среды:

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 41,63 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Охладите среду до 45–50 °C.
4. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
5. Не автоклавируйте приготовленную среду.

Принцип действия и интерпретация результатов

Escherichia coli используют как индикаторный микроорганизм для определения санитарно-эпидемиологического неблагополучия. Для обогащения, предположительной идентификации и подтверждения присутствия колиформных микроорганизмов применяют селективные среды; такие процедуры требуют более длительной инкубации.

Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным рекомендован APHA для обнаружения и количественного определения колиформных микроорганизмов в пищевых продуктах и молочных продуктах. Добавление MUG позволяет быстро обнаруживать E. coli по флуоресценции среды под ультрафиолетовым светом без дополнительного подтверждения.

E. coli содержит фермент β-глюкуронидазу, который специфически расщепляет MUG с образованием флуорогенного соединения 4-метилумбеллиферона. Это соединение вызывает видимую сине-зелёную флуоресценцию. Поэтому агар с желчными солями, кристаллвиолетом, нейтральным красным и MUG предназначен для специфического обнаружения E. coli.

Пептон, дрожжевой экстракт и лактоза обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами. Кристаллвиолет и соли желчных кислот подавляют рост некоторых грамположительных и грамотрицательных бактерий. Нейтральный красный служит индикатором pH и способствует появлению красных колоний при образовании кислоты в результате ферментации лактозы.

Кислая реакция снижает интенсивность флуоресценции и затрудняет идентификацию флуоресцирующих колоний E. coli. После первичной идентификации, основанной на выявлении красных колоний, окружённых осадком желчных солей, чашки подвергают воздействию паров аммиака для усиления флуоресценции. Гидролиз MUG осуществляется ферментом β-глюкуронидазой, который присутствует у большинства штаммов E. coli, а также у некоторых штаммов Salmonella, Shigella и Yersinia. Результатом гидролиза является флуоресцирующий продукт — 4-метилумбеллиферон.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 20–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Флуоресценцию можно визуализировать добавлением раствора NaOH или воздействием паров аммиака.

• Klebsiella aerogenes ранее классифицировалась как Enterobacter aerogenes.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 4,16 % при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,20–7,60.

Технические характеристики

• Наименование среды: желчный агар с кристаллвиолетом, нейтральным красным и MUG.
• Артикул: M1058-500G.
• Назначение изделия: агар.
• Флуорогенный субстрат: 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид (MUG).
• Форма выпуска: порошок.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: ПЭНД (полиэтилен высокой плотности, HDPE).
• Происхождение компонентов: животное.
• Фасовка: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Рабочий диапазон pH: 7,20–7,60.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.