HiMedia M1058-100G Фиолетово-красный желчный агар с MUG

Питательная агаровая среда HiMedia M1058-100G «Фиолетово-красный желчный агар с MUG» предназначена для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов флуорогенным методом и выпускается в виде порошка массой 100 г. Среда применяется для анализа пищевых продуктов, молочных и водных проб; приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов флуорогенным методом. Области применения:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• пробы воды.

Состав

Состав среды на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Escherichia coli используется как индикаторный микроорганизм для определения санитарного неблагополучия. Для обогащения, предварительной идентификации и подтверждения присутствия колиформных микроорганизмов применяют селективные среды, однако такие процедуры требуют более продолжительной инкубации.

Фиолетово-красный желчный агар рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов в пищевых и молочных продуктах. Добавление MUG обеспечивает быстрое выявление E. coli: при наблюдении среды в ультрафиолетовом свете флуоресценция позволяет идентифицировать микроорганизм без дальнейшего подтверждения.

E. coli продуцирует фермент β-глюкуронидазу, который специфически расщепляет MUG с образованием флуорогенного соединения 4-метилумбеллиферона. Образующийся продукт вызывает видимую сине-зелёную флуоресценцию. Поэтому фиолетово-красный желчный агар с MUG рекомендован для специфического выявления E. coli.

Пептон, дрожжевой экстракт и лактоза обеспечивают среду основными питательными веществами. Кристаллический фиолетовый и желчные соли подавляют рост некоторых грамположительных и грамотрицательных бактерий. Нейтральный красный служит индикатором pH и способствует проявлению красных колоний при образовании кислоты в результате ферментации лактозы.

Кислая реакция снижает интенсивность флуоресценции и затрудняет идентификацию флуоресцирующих колоний E. coli. После первичной идентификации — обнаружения красных колоний, окружённых осадком желчных солей, — чашки подвергают воздействию паров аммиака для усиления флуоресценции.

Субстрат MUG гидролизуется ферментом β-глюкуронидазой, присутствующим у большинства штаммов E. coli, а также у некоторых штаммов Salmonella, Shigella и Yersinia, с образованием флуоресцирующего конечного продукта — 4-метилумбеллиферона.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 41,63 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Охладите среду до 45–50 °C.
4. Тщательно перемешайте.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
6. Не автоклавируйте приготовленную среду.

Тип образца

• пищевые и молочные продукты;
• вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных продуктов используйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на данной среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для выявления конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований методики.
3. Для подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красно-фиолетового цвета.

Реакция

Реакция 4,16%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 20–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Флуоресценцию можно визуализировать добавлением раствора NaOH или воздействием паров аммиака.

• Ранее микроорганизм обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды с помощью автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1058-100G
• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Автоклавирование: не допускается

Состав упаковки

• Сухая питательная агаровая среда, 100 г.