HiMedia M1055-500G TOC агар

Дифференциальная питательная среда HiMedia M1055-500G TOC агар предназначена для предварительной идентификации и дифференциации Candida albicans и Cryptococcus neoformans. Применяется в микробиологических и клинических лабораториях для выявления ростовых и морфологических признаков грибов с образованием ростковых трубок, хламидоспор или коричневого пигмента.

Назначение

TOC Agar — дифференциальная питательная среда для предварительной идентификации и дифференциации Candida albicans и Cryptococcus neoformans.

• Назначение изделия: агар
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Candida — дрожжеподобные грибы, входящие в состав нормальной микрофлоры ротовой полости и глотки, кишечного и полового трактов. При определённых условиях они вызывают опасные для жизни заболевания, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом.

Candida albicans — наиболее часто выделяемый вид у пациентов практически при всех формах кандидоза. Cryptococcus neoformans часто выявляют в моче пациентов с диссеминированной инфекцией. Криптококкоз относится к заболеваниям, ассоциированным со СПИДом.

TOC Agar — универсальная среда для быстрой предварительной идентификации Candida albicans и Cryptococcus neoformans. Оба вида часто выделяются в клинических образцах и могут быть предварительно идентифицированы по специфическим морфологическим признакам.

Candida albicans и Candida stellatoides могут быть предварительно идентифицированы на этой среде по образованию ростковых трубок и хламидоспор. Сочетание сорбитанмоноолеата 80 и бычьей желчи способствует их быстрому последовательному развитию.

Cryptococcus neoformans может быть идентифицирован по образованию характерного коричневого пигмента на этой среде. Кофейная кислота является субстратом для фенолоксидазы — фермента, который продуцируется только Cryptococcus neoformans. В результате последующей ферментативной реакции образуется меланин, поглощаемый клеточной стенкой дрожжевых клеток, что приводит к появлению окраски от светло-коричневой до коричневой.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,3 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте.
3. Осторожно нагрейте и доведите до кипения.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика теста на ростковые трубки

1. Слегка коснитесь одной колонии, выросшей на TOC Agar, петлёй или пипеткой Пастера.
2. Удалите избыток посевного материала.
3. Эмульгируйте дрожжевые клетки в 0,5 мл конской или другой сыворотки в небольшой пробирке, закрытой неплотной ватной пробкой.
4. Используйте небольшой объём посевного материала: недостаточно лёгкий посев подавляет образование ростковых трубок.
5. Инкубируйте пробирку в водяной бане при 37 °C в течение 2–4 ч.
6. Нанесите каплю суспензии на предметное стекло и накройте покровным стеклом.
7. Проведите микроскопическое исследование.

При типичном микроскопическом исследовании Candida albicans выявляются тонкие ростковые трубки диаметром 3–4 мм и длиной до 20 мм. В отличие от псевдогиф ростковые трубки не имеют перетяжки в месте образования.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Реакция: реакция 4,03%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH по контролю качества: 6,30–6,70.
• Рабочий pH: 6,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Использование: до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• Температурный режим, указанный в карточке товара: 10–30 °C.

Сравнительное техническое отличие

TOC Agar одновременно поддерживает предварительную дифференциацию Candida albicans по образованию ростковых трубок и хламидоспор и выявление Cryptococcus neoformans по образованию коричневого пигмента.