HiMedia M1055-500G TOC агар

Дифференциальная питательная среда HiMedia M1055-500G TOC агар для предварительной идентификации и дифференциации Candida albicans и Cryptococcus neoformans. Применяется в клинической микробиологии для быстрого выявления патогенных дрожжеподобных грибов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

TOC агар разработан для экспресс-идентификации C. albicans и C. neoformans на основе их специфических морфологических и биохимических характеристик.

• Идентификация C. albicans и C. stellatoides: на данной среде эти виды идентифицируются по образованию рост-трубок (germ tubes) и хламидоспор. Сочетание сорбитана моноолеата 80 и бычьей желчи стимулирует их быстрое последовательное развитие.
• Идентификация C. neoformans: данный вид идентифицируется по выработке характерного коричневого пигмента. Кофейная кислота служит субстратом для фенолоксидазы — фермента, который вырабатывается только C. neoformans. В результате ферментативной реакции образуется меланин, который абсорбируется клеточной стенкой дрожжей, что приводит к окрашиванию колоний в бежевый или коричневый цвет.

Методика проведения теста на рост-трубки

1. С помощью петли или пипетки Пастера осторожно коснитесь одной колонии, выросшей на TOC агаре.
2. Удалите излишки посевного материала и эмульгируйте клетки дрожжей в 0,5 мл лошадиной или другой сыворотки в небольшой пробирке с неплотной ватной пробкой. Важно избегать избыточной концентрации инокулята, так как это подавляет образование рост-трубок.
3. Инкубируйте пробу в водяной бане при 37 °C в течение 2–4 ч.
4. Поместите каплю суспензии на предметное стекло и накройте покровным стеклом.
5. При микроскопическом исследовании типичные C. albicans характеризуются наличием тонких рост-трубок диаметром 3–4 мкм и длиной до 20 мкм; в отличие от псевдогиф, рост-трубки не имеют сужения в точке отхождения от клетки.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 40,3 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте.
3. Осторожно нагрейте до кипения.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите до 50 °C и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,5 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH раствора: 6,30–6,70

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 30 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.