ТОС агар для дифференциации Candida и Cryptococcus HiMedia M1055-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда ТОС агар для дифференциации Candida и Cryptococcus HiMedia M1055-100G (уп/100 гр). Применяется для предварительной идентификации Candida albicans и Cryptococcus neoformans на основе анализа морфологических характеристик и пигментации колоний.

Принцип измерения

Среда предназначена для быстрого разделения видов дрожжеподобных грибов. Идентификация C. albicans и C. stellatoides основана на формировании рост-трубок (germ tubes) и хламидоспор, чему способствует комбинация сорбитана моноолеата 80 и бычьей желчи. Идентификация C. neoformans осуществляется по продукции характерного коричневого пигмента: кофейная кислота служит субстратом для фенолоксидазы (фермента, вырабатываемого только C. neoformans), в результате чего образуется меланин, поглощаемый клеточной стенкой дрожжей.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 40,3 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешать.
3. Осторожно нагреть до кипения.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладить до 50 °C и разлить по стерильным чашкам Петри.

Тест на рост-трубки (germ tube test)

1. Слегка коснуться петлёй или пастеровской пипеткой одиночной колонии на ТОС-агаре.
2. Удалить излишки и эмульгировать клетки дрожжей в 0,5 мл лошадиной или другой сыворотки в небольшой пробирке с неплотной ватной пробкой (избегайте высокой концентрации инокулята, так как это подавляет формирование рост-трубок).
3. Инкубировать в водяной бане при 37 °C в течение 2–4 часов.
4. Поместить каплю суспензии на предметное стекло и накрыть покровным стеклом.
5. При микроскопическом исследовании типичные C. albicans характеризуются наличими тонких рост-трубок диаметром 3–4 мкм и длиной до 20 мкм, которые, в отличие от псевдогиф, не имеют перетяжки в точке отхождения от клетки.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: Дифференциальный агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Финальный pH (при 25 °C): 6,5 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,30–6,70

Состав

Состав, г/л:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 30 °C в течение 24–48 часов.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: pH 4,03 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 6,5 $\pm$ 0,2.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.