ТОС агар для дифференциации Candida и Cryptococcus HiMedia M1055-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда ТОС агар для дифференциации Candida и Cryptococcus HiMedia M1055-100G (уп/100 гр) — порошковая среда для предположительной идентификации Candida albicans и Cryptococcus neoformans. Применяется в микробиологических и клинических лабораториях для дифференциации дрожжеподобных грибов по образованию ростовых трубок, хламидоспор и коричневого пигмента; конечный pH среды составляет 6,5 ± 0,2.

Назначение и область применения

ТОС агар — дифференциальная питательная среда для предположительной идентификации и дифференциации Candida albicans и Cryptococcus neoformans.

Candida — дрожжеподобные грибы, входящие в состав нормальной микрофлоры полости рта и глотки, кишечного и полового трактов. При определённых условиях, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом, представители рода могут вызывать жизнеугрожающие заболевания.

Candida albicans чаще всего выделяется от пациентов при различных формах кандидоза. Cryptococcus neoformans часто обнаруживается в моче пациентов с диссеминированной инфекцией. Криптококкоз относится к заболеваниям, ассоциированным со СПИДом.

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип дифференциации

ТОС агар разработан для быстрой предположительной идентификации C. albicans и C. neoformans по характерным морфологическим признакам.

• C. albicans и C. stellatoides могут быть предположительно идентифицированы по образованию ростовых трубок и хламидоспор.
• Сочетание моноолеата сорбитана 80 и бычьей желчи способствует быстрому последовательному образованию ростовых трубок и хламидоспор.
• C. neoformans может быть идентифицирован по образованию характерного коричневого пигмента на среде.
• Кофейная кислота служит субстратом для фенолоксидазы — фермента, продуцируемого только C. neoformans.
• В результате ферментативной реакции образуется меланин, который поглощается клеточной стенкой дрожжей и придаёт колониям окраску от светло-коричневой до коричневой.

Приготовление питательной среды

1. Суспендируйте 40,3 г среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте.
3. Осторожно нагрейте суспензию и доведите до кипения.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика определения ростовых трубок

1. Легко коснитесь одной колонии, выросшей на ТОС агаре, петлёй или пастеровской пипеткой.
2. Удалите избыток посевного материала.
3. Эмульгируйте клетки дрожжей в 0,5 мл лошадиной сыворотки или другой сыворотки в небольшой пробирке, закрытой неплотной ватной пробкой.
4. Инкубируйте пробирку при 37 °C на водяной бане в течение 2–4 ч.
5. Поместите каплю суспензии на предметное стекло и накройте покровным стеклом.
6. Проведите микроскопическое исследование.

Недостаточная концентрация посевного материала препятствует образованию ростовых трубок.

При микроскопическом исследовании типичные клетки C. albicans образуют тонкие ростовые трубки диаметром 3–4 мм и длиной до 20 мм. В отличие от псевдогиф, ростовые трубки не имеют перетяжки в месте происхождения.

Конечные характеристики среды

• Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,03 % м/об при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,30–6,70.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Внешний вид сухой среды: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: дифференциальная.
• Назначение изделия: агар.
• Масса упаковки: 100 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Конечный pH при 25 °C: 6,5 ± 0,2.
• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Контроль качества

Контроль качества включает оценку внешнего вида порошка, способности к гелеобразованию, цвета и прозрачности приготовленной среды, реакции водного раствора и значения pH.

Отличие по диагностическим признакам

В отличие от сред, предназначенных только для культивирования дрожжей, ТОС агар сочетает дифференциацию C. albicans по образованию ростовых трубок и хламидоспор с выявлением C. neoformans по образованию коричневого пигмента.