Основа угольного агара с ниацином для бордетелл HiMedia M1053-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа угольного агара с ниацином для бордетелл HiMedia M1053-500G (уп/500 гр) — порошковая основа с содержанием угля 4,000 г/л и никотиновой кислоты (ниацина) 0,001 г/л. Среда предназначена для культивирования Bordetella pertussis и Haemophilus influenzae в профессиональной лабораторной диагностике in vitro; образцы включают мокроту и спинномозговую жидкость.

Назначение

Основа угольного агара с ниацином применяется для:

• первичного выделения Bordetella pertussis;
• культивирования Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica и других видов рода Bordetella;
• культивирования и выделения Haemophilus influenzae после преобразования среды в шоколадный агар;
• замены агара Борде–Жангу при выделении Bordetella pertussis;
• производства вакцин против Bordetella pertussis;
• поддержания маточных культур Bordetella pertussis на скошенной поверхности среды с еженедельными пересевами.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Род Bordetella включает четыре вида: Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica и Bordetella avium. Генетические исследования показывают, что эти микроорганизмы имеют тесное родство.

Человек является единственным хозяином B. pertussis и B. parapertussis. B. bronchiseptica встречается у широкого спектра животных и иногда выявляется у человека. B. avium обнаруживается у птиц.

Виды Bordetella являются облигатными аэробами и характеризуются низкой метаболической активностью. Все виды неподвижны, за исключением B. bronchiseptica. B. pertussis — основная причина коклюша. B. parapertussis связан с более лёгкой формой заболевания.

Для первичного выделения, особенно B. pertussis, требуется добавление угля и 15–20 % крови для нейтрализации ингибирующих рост воздействий. Выделение этого микроорганизма требует обогащённой среды. Угольный агар приготовлен по методу Mishulow, Sharpe и Cohen.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• желатиновый пептон и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы источниками азота и углерода, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• растворимый крахмал и уголь нейтрализуют токсичные для видов Bordetella вещества, включая жирные кислоты;
• никотиновая кислота необходима как фактор роста.

Уголь имеет тенденцию оседать на дне колбы. Перед разливом необходимо осторожно вращать колбы для получения однородной суспензии угля.

При выделении Bordetella pertussis из носоглоточного секрета затруднение вызывает подавление сопутствующей микрофлоры во время длительной инкубации на питательных средах. Для ограничения роста других контаминантов в среду можно добавлять пенициллин. Однако устойчивые к пенициллину микроорганизмы по-прежнему вызывают контаминацию. Метициллин показал более высокую эффективность по сравнению с пенициллином в подавлении нежелательной носоглоточной флоры. Цефалексин показал ещё более высокую эффективность по сравнению с метициллином.

Среда может использоваться вместо агара Борде–Жангу для выделения Bordetella pertussis и производства вакцин против Bordetella pertussis. Угольный агар с ниацином и лошадиной кровью также может использоваться для культивирования и выделения Haemophilus influenzae. Угольный агар с ниацином можно преобразовать в шоколадный агар для выделения видов Haemophilus.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 51,0 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильную дефибринированную кровь в количестве 10 % и регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Bos (FD004).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Для видов Haemophilus среду можно преобразовать в шоколадный агар.

Тип образцов

• Клинические образцы: мокрота.
• Клинические образцы: спинномозговая жидкость.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения

1. Некоторые виды Haemophilus растут на средах для выделения Bordetella и дают перекрёстную реакцию с антисыворотками к B. pertussis.
2. Колонии B. pertussis могут быть не видны без микроскопа после 2–4 суток.
3. Устойчивые к пенициллину микроорганизмы носоглоточной флоры могут вызывать контаминацию среды.
4. Уголь оседает на дне колбы, поэтому перед разливом требуется осторожно перемешивать содержимое для получения однородной суспензии.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от серого до серовато-чёрного цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: чёрный непрозрачный гель с нерастворившимися чёрными частицами, образующийся в чашках Петри.
• Реакция: реакция 5,1%-