Основа угольного агара с ниацином для бордетелл HiMedia M1053-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда (основа) угольного агара с ниацином для бордетелл HiMedia M1053-500G. Рекомендуется для культивирования Bordetella pertussis и Haemophilus influenzae; сертификат ФСЗ 2009/03706.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для первичного выделения бактерий рода Bordetella, в частности B. pertussis (основной возбудитель коклюша), B. parapertussis, B. bronchiseptica и B. avium. Данные микроорганизмы являются облигатными аэробами и обладают низкой метаболической активностью.

Для нейтрализации эффектов, подавляющих рост B. pertussis, в состав среды включены активированный уголь и кровь (добавляется при приготовлении). Угольный агар может использоваться как замена агара Борде-Генгу для выделения B. pertussis и производства соответствующих вакцин. При добавлении конской крови среда также подходит для культивирования Haemophilus influenzae.

Функции компонентов:

• Желатиновый пептон и пептон HM B: источники азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и других эссенциальных питательных веществ.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического баланса.
• Растворимый крахмал и уголь: нейтрализация токсичных для бордетелл веществ, таких как жирные кислоты.
• Никотиновая кислота (ниацин): необходимый фактор роста.

Для подавления нежелательной назофарингеальной флоры при длительной инкубации в среду может быть добавлен антимикробный агент (например, цефалексин или метициллин).

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 51,0 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить 10 % стерильной дефибринированной крови и содержимое одной ампулы селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004).
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Примечание: Для выделения видов Haemophilus данную среду можно преобразовать в шоколадный агар. Перед разливом флаконы следует осторожно перемешать для получения однородной суспензии угля, так как он имеет тенденцию оседать на дно.

Работа с образцами

• Типы образцов: клинический материал (мокрота, спинномозговая жидкость).
• Обращение: сбор и транспортировка должны осуществляться согласно установленным руководствам по работе с биоматериалом.

Технические характеристики

• Внешний вид: серый или серо-черный гомогенный свободнотекущий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: черный непрозрачный гель с нерастворенными черными частицами.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении стерильной дефибринированной крови и селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Некоторые виды Haemophilus могут расти на средах для изоляции Bordetella и давать перекрестную реакцию с антисыворотками к B. pertussis.
• Колонии B. pertussis могут быть не видны без использования микроскопа через 2–4 дня инкубации.
• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом проветриваемом месте. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.