HiMedia M1048-500G Модифицированная основа M-Enterococcus агара

Питательная среда HiMedia M1048-500G Модифицированная основа M-Enterococcus агара представляет собой сухой порошок массой 500 г для приготовления селективной среды. Модифицированная основа M-Enterococcus агара применяется для выделения и количественного определения энтерококков в пробах воды методом мембранной фильтрации совместно с агаром Esculin Iron Agar M1044 для подтверждения идентификации.

Назначение

Модифицированная основа M-Enterococcus агара предназначена для выделения энтерококков в пробах воды методом мембранной фильтрации с последующей идентификацией на агаре Esculin Iron Agar M1044.

Среда применяется для определения и количественного учёта энтерококков в санитарно-бактериологическом контроле рекреационной, питьевой, пресной, эстуарной и морской воды, а также воды в районах выращивания моллюсков. Основа M-Enterococcus агара, модифицированная, используется как селективная среда, а Esculin Iron Agar M1044 — для подтверждения идентификации колоний по способности микроорганизмов гидролизовать эскулин.

Состав

Состав на 1 л очищенной или дистиллированной воды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1048-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 7,14 % м/о при 25 °C
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара

Принцип действия

Желатиновый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми питательными веществами, минеральными компонентами, витаминами и другими факторами роста. Хлорид натрия поддерживает изотонические условия среды и обеспечивает микроорганизмы необходимыми ионами.

Азид натрия, циклогексимид и налидиксовая кислота подавляют рост большого числа бактерий и грибов, обеспечивая селективность среды.

Эскулин гидролизуется ферментами бактерий с образованием эскулетина и декстрозы. Трифенилтетразолийхлорид (TTC) восстанавливается энтерококками до нерастворимого формазана — красного соединения внутри бактериальной клетки, в результате чего формируются колонии от розового до красного цвета.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 71,45 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунт-сил/дюйм², что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 15 мл стерильного 1%-го раствора TTC FD057.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика проведения анализа

Для количественного определения и идентификации энтерококков используют две питательные среды: модифицированную основу M-Enterococcus агара M1048 и Esculin Iron Agar M1044.

1. Профильтруйте пробу воды через мембранный фильтр.
2. Перенесите использованный мембранный фильтр на чашку с модифицированным агаром M-Enterococcus.
3. Инкубируйте при 41 °C в течение 48 ч.
4. После инкубации перенесите мембранный фильтр на чашку с Esculin Iron Agar M1044.
5. Дополнительно инкубируйте при 41 °C в течение 20 мин.
6. После инкубации подсчитайте и зарегистрируйте колонии на мембранных фильтрах, содержащих от 20 до 60 колоний розового или красного цвета с чёрным либо красновато-коричневым осадком на нижней стороне мембраны.
7. При необходимости для подсчёта видимых колоний используйте увеличительное стекло и флуоресцентную лампу.

Конечную концентрацию энтерококков рассчитывают по формуле:

Энтерококки/100 мл = (число колоний энтерококков / объём профильтрованной пробы, мл) × 100

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 40–42 °C в течение 48 ч на модифицированном агаре M-Enterococcus с добавлением стерильного 1%-го раствора TTC FD057 и после инкубации при 40–42 °C в течение 20 мин на Esculin Iron Agar M1044.

• Соответствующие номера WDCM.

Внешний вид и контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Реакция: pH 7,1 ± 0,2 для 7,14%-го водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-м агаровым гелем.

Для Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) ожидается подавление роста. Для Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) ожидается хороший–обильный рост розово-красных колоний на мембранном фильтре и положительная реакция гидролиза эскулина с образованием чёрного или коричневого осадка на нижней стороне мембраны.

Тип образца

• Пробы воды.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Условия хранения: сухое проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Рабочие характеристики среды ожидаются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различные особенности роста на среде.
• Каждая партия среды протестирована