Питательная агаровая среда Лактозный агар с лецитином HiMedia M1047-500G (уп/500 гр) предназначена для выделения и дифференциации гистотоксических клостридий из клинических образцов. Среда применяется для анализа кала и материала из абсцессов с учётом необходимости предварительного восстановления и поддержания анаэробных условий.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и дифференциации гистотоксических клостридий из клинических образцов.

Тип образца: клинический материал — кал, содержимое абсцессов.

Состав

Состав, г/л:

Эквивалент: панкреатический перевар сердечной мышцы.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 58,48 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Виды рода Clostridium широко распространены в природе и также связаны с организмом человека: они могут присутствовать как непатогенные микроорганизмы в различных анатомических локализациях или обнаруживаться в инфицированных участках. Заболевания, вызываемые представителями рода Clostridium, в целом относятся к одной из трёх категорий:

• неинвазивные заболевания, при которых все симптомы обусловлены токсином или токсинами;
• инвазивные, или гистотоксические, заболевания с прогрессирующим инфекционным процессом и разрушением тканей;
• гнойные заболевания, при которых в замкнутом пространстве развивается смешанная инфекция с участием нескольких микроорганизмов.

Гистотоксические клостридии могут быть выделены на среде, содержащей яичный желток. Для дифференциации клостридий такую среду дополнительно обогащали молоком и лактозой по признакам продукции лецитиназы, гидролиза казеина и ферментации лактозы. Селективность обеспечивалась добавлением сульфата неомицина. В дальнейшем яичный компонент заменили очищенным лецитином для получения среды без яичного сырья. Затем состав этой среды был модифицирован: концентрацию неомицина снизили, а количество азида натрия увеличили, что повысило селективные свойства среды. Полученная модифицированная среда получила название «Лактозный агар с лецитином» и используется для выделения и дифференциации гистотоксических клостридий из клинических образцов.

Функции компонентов среды:

• триптон, пептон и гидролизат HM обеспечивают углеродистые и азотистые соединения, необходимые для роста бактерий;
• лактоза является сбраживаемым углеводом;
• бромкрезоловый пурпуровый служит индикатором pH;
• L-цистеин способствует созданию анаэробных условий;
• дрожжевой экстракт поставляет питательные вещества витаминного комплекса B;
• кукурузный крахмал нейтрализует токсичные жирные кислоты, если они присутствуют в среде;
• неомицин и азид натрия подавляют сопутствующие грамотрицательные и грамположительные микроорганизмы.

Проведение анализа и интерпретация результатов

Перед инокуляцией приготовленные чашки со средой необходимо предварительно восстановить, выдержав их в анаэробных условиях в течение 18–24 ч.

Клинические образцы инокулируют на предварительно восстановленные чашки. Одновременно необходимо инокулировать неселективную питательную среду.

Интерпретация признаков:

• опалесцирующая зона вокруг колоний указывает на продукцию лецитиназы;
• жёлтая зона вокруг колоний указывает на ферментацию лактозы.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Клинические образцы необходимо транспортировать надлежащим образом в анаэробных условиях.
2. Для оптимального выделения микроорганизмов необходимо поддерживать соответствующие анаэробные условия.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель светло-фиолетового цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,85 % масс./об. при 25 °C.

pH по реакции раствора: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч.

Ранее известен как Clostridium sordellii.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении в соответствии с инструкцией на этикетке, использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

Температура хранения сух