Железо-эскулиновый агар HiMedia M1044-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Железо-эскулиновый агар HiMedia M1044-500G (уп/500 гр) производства HiMedia с химически определённым составом. Среда предназначена для подтверждения колоний энтерококков в пробах пресной и морской рекреационной воды после мембранной фильтрации; для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Железо-эскулиновый агар HiMedia M1044 применяется для подтверждения колоний энтерококков на мембранных фильтрах после их инкубации на модифицированном агаре M-Enterococcus (M1048).

Энтерококки используют как индикаторы санитарного качества рекреационных вод, поскольку они присутствуют в фекалиях человека и теплокровных животных. Определение и количественный учёт энтерококков необходимы для оценки санитарного состояния воды, поскольку гастроэнтерит связан с купанием в рекреационной воде и зависит от плотности энтерококков.

Тип исследуемого образца

• Образец: вода

Состав

Формула среды рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Масса среды для приготовления: 16,5 г на 1000 мл воды
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2

Принцип измерения и интерпретация

Эскулин в составе среды гидролизуется энтерококками с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с солью железа — цитратом аммония железа — с образованием комплекса от тёмно-коричневого до чёрного цвета, который появляется вокруг колоний.

В методике мембранной фильтрации используют две среды совместно:

• модифицированный агар M-Enterococcus (M1048) служит селективной средой;
• железо-эскулиновый агар M1044 подтверждает идентификацию колоний по способности гидролизовать эскулин.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 16,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения при частом перемешивании.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри слоем толщиной 4–5 мм.

Методика мембранной фильтрации и подтверждения колоний

1. Профильтруйте исследуемую пробу воды через мембранный фильтр.
2. Асептически поместите мембранный фильтр на поверхность модифицированного агара M-Enterococcus (M1048).
3. Инкубируйте чашку при 40–42 °C в течение 48 ч.
4. После инкубации асептически перенесите мембранный фильтр на чашку с железо-эскулиновым агаром M1044.
5. Инкубируйте мембранный фильтр на железо-эскулиновом агаре при 40–42 °C в течение 20 мин.
6. После инкубации подсчитайте и зарегистрируйте количество колоний от розового до красного цвета с чёрным или красновато-коричневым осадком на нижней стороне мембранного фильтра.
7. При необходимости для подсчёта видимых колоний используйте лупу или флуоресцентную лампу.

Расчёт результата

Количество энтерококков в 100 мл рассчитывают по формуле:

Энтерококки/100 мл = (число колоний энтерококков / объём профильтрованной пробы, мл) × 100

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-коричневый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета — прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 1,65 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 7,1 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 40–42 °C в течение 18–24 ч на модифицированном агаре M-Enterococcus (M1048), а затем после инкубации в течение 20 мин при 40–42 °C на железо-эскулиновом агаре M1044.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора проб и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и локальными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая упаковка
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Требования после вскрытия: хранить в сухом виде