Железо-эскулиновый агар HiMedia M1044-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Железо-эскулиновый агар HiMedia M1044-500G (уп/500 гр) производства HiMedia с сертификатом ФСЗ 2009/03705. Рекомендуется для подтверждения энтерококковых колоний на мембранных фильтрах после их инкубации на модифицированном агаре M-Enterococcus (M1048).

Принцип измерения и интерпретация

Энтерококки являются индикаторами санитарного качества рекреационных вод, так как присутствуют в фекалиях людей и теплокровных животных. Железо-эскулиновый агар используется совместно с модифицированным агаром M-Enterococcus (M1048) для верификации энтерококковых колоний в пресных и морских рекреационных водах согласно рекомендациям APHA.

Принцип анализа основан на гидролизе эскулина энтерококками с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин вступает в реакцию с солью железа (цитратом аммония-железа (III)), в результате чего вокруг колоний образуется комплекс тёмно-коричневого или чёрного цвета.

Методика проведения анализа

При использовании метода мембранной фильтрации применяются две среды: селективная (M-Enterococcus Agar, Modified M1048) и подтверждающая (Esculin Iron Agar M1044).

1. Мембранный фильтр с отфильтрованным образцом воды асептически помещают на поверхность модифицированного агара M-Enterococcus (M1048).
2. Инкубируют при температуре 40–42 °C в течение 48 часов.
3. После инкубации мембрану асептически переносят на чашку с железо-эскулиновым агаром (M1044).
4. Инкубируют при температуре 40–42 °C в течение 20 минут.
5. Подсчитывают количество розовых или красных колоний, имеющих чёрный или красно-коричневый осадок на нижней стороне мембраны. При необходимости используют лупу или флуоресцентную лампу.

Для окончательного расчёта используется формула: $\text{Enterococci/100ml} = \frac{\text{Количество энтерококковых колоний}}{\text{Объём отфильтрованного образца (мл)}} \times 100$

Приготовление и стерилизация

1. Суспендировать 16,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения при частом перемешивании.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C и разлить в стерильные чашки Петри слоем 4–5 мм.

Технические характеристики

Общие параметры

• Тип среды: Диагностический агар
• Физическая форма: Порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: Янтарный цвет, от прозрачного до слегка опалесцирующего геля
• Реакция (pH) 1,65% водного раствора при 25 °C: 7,1 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Желирование: Плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение: Химически определенная среда

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 40–42 °C в течение 18–24 ч на модифицированном агаре M-Enterococcus (M1048) и последующей инкубации при 40–42 °C в течение 20 мин на железо-эскулиновом агаре (M1044).

Область применения и ограничения

• Тип образцов: Пробы воды.
• Назначение: Контроль санитарного качества рекреационных вод.
• Ограничения: Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: При температуре 20–30 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Контаминированные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.