HiMedia M1044-100G Эскулин-железный агар

Питательная агаризованная среда HiMedia M1044-100G Эскулин-железный агар с содержанием агара 15,000 г/л предназначена для подтверждения энтерококковых колоний после мембранной фильтрации проб воды. Среда применяется для санитарно-бактериологического контроля воды; для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Эскулин-железный агар рекомендуется для подтверждения энтерококковых колоний на мембранных фильтрах, через которые профильтрованы пробы воды и которые предварительно инкубировались на модифицированном агаре M-Enterococcus (M1048).

Энтерококки используют как индикаторы санитарного качества рекреационных вод, поскольку они присутствуют в фекалиях человека и теплокровных животных. Определение и количественный учёт энтерококков необходимы из-за связи гастроэнтерита с купанием в рекреационной воде и плотностью энтерококков.

Среда M1044 применяется совместно с модифицированным агаром M-Enterococcus (M1048) для подтверждения энтерококковых колоний в пресной и морской рекреационной воде в соответствии с методикой APHA.

Состав

Формула среды на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип измерения и интерпретация

Эскулин в составе среды гидролизуется энтерококками с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с солью железа — цитратом аммония железа — с образованием комплекса от тёмно-коричневого до чёрного цвета, который появляется вокруг колоний.

В методе мембранной фильтрации используют две среды:

• модифицированный агар M-Enterococcus (M1048) — селективная среда;
• эскулин-железный агар (M1044) — среда для подтверждения идентификации колоний по способности гидролизовать эскулин.

После инкубации на модифицированном агаре M-Enterococcus мембрану переносят на эскулин-железный агар. Подсчитывают колонии от розового до красного цвета с чёрным или красновато-коричневым осадком на нижней стороне мембраны.

Для подсчёта видимых колоний при необходимости используют лупу или флуоресцентную лампу.

Методика проведения анализа

1. Профильтруйте исследуемую пробу воды через мембранный фильтр.
2. Асептически поместите мембранный фильтр на поверхность модифицированного агара M-Enterococcus (M1048).
3. Инкубируйте при 40–42 °C в течение 48 ч.
4. После инкубации асептически перенесите мембранный фильтр на чашку с эскулин-железным агаром (M1044).
5. Инкубируйте при 40–42 °C в течение 20 мин.
6. Подсчитайте и зарегистрируйте количество колоний от розового до красного цвета с чёрным или красновато-коричневым осадком на нижней стороне мембраны.
7. Рассчитайте содержание энтерококков по формуле:

Энтерококки/100 мл = (число энтерококковых колоний / объём профильтрованной пробы, мл) × 100

Приготовление среды

1. Суспендируйте 16,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения при частом перемешивании.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте в стерильные чашки Петри слоем толщиной 4–5 мм.

Тип образца

• Пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам и локальным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M1044-100G
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: химически определённая среда
• Тип продукта: стандартный
• Масса: 100 г
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Диапазон хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 1,65 % (масса/объём) при 25 °C.

pH: 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации на модифицированном агаре M-Enterococcus (M1048) при 40–42 °C в течение 18–24 ч и последующей инкубации на эскулин-железном агаре (M1044) в течение 20 мин при 40–42 °C.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при 20–30 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

Для полной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при работе с образцами и культурами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Соб