Основа желточного агара модифицированного HiMedia M1043-500G (уп/500 гр)

Основа желточного агара модифицированного HiMedia M1043-500G (уп/500 гр) предназначена для идентификации анаэробных бактерий по реакции с желточной эмульсией. Среда используется для выделения и обнаружения анаэробных микроорганизмов, включая Clostridium perfringens, с оценкой лецитиназной, липазной и протеолитической активности.

Назначение

Основа желточного агара модифицированного применяется для идентификации анаэробных бактерий по реакции с желточной эмульсией. Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения.

Тип изделия: основа питательной среды
Форма: порошок
Происхождение: животное
Фасовка: 500 г
Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа желточного агара модифицированного разработана на основе агара Мак-Кланга и Тоабе для выделения и обнаружения Clostridium perfringens. В качестве основы используется CDC-агар для анаэробов — неселективная, обогащённая среда для культивирования облигатных анаэробов, разработанная Центром по контролю заболеваний (CDC). Добавление желточной эмульсии делает среду пригодной для выявления активности липазы и лецитиназы.

Триптон и соевый пептон обеспечивают необходимые питательные вещества, а также источники углерода и азота. Дрожжевой экстракт поставляет витамины группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. L-цистин является аминокислотой и одновременно выполняет функцию восстановителя. Витамин K1 и гемин способствуют росту анаэробных микроорганизмов.

Лецитиназоположительные микроорганизмы расщепляют лецитин, содержащийся в желточной эмульсии, с образованием нерастворимого непрозрачного осадка вокруг колоний. Липазоположительные микроорганизмы расщепляют свободные жирные кислоты в желточной эмульсии, формируя радужный блеск на поверхности колоний. Липазная активность может проявляться с задержкой, поэтому чашки нельзя считать отрицательными до завершения инкубации в течение одной недели. Протеолитическая активность определяется по появлению прозрачных зон вокруг колоний.

Пищевое отравление, вызываемое Clostridium perfringens, относится к распространённым видам пищевых инфекций человека. Обычно оно связано с готовыми мясными продуктами или продуктами из мяса птицы, содержащими большое количество жизнеспособных клеток. Основные симптомы при отравлении C. perfringens вызывает термолабильный энтеротоксин, продуцируемый только спорулирующими клетками.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 50,41 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 100 мл желточной эмульсии FD045. Допустимый вариант дозирования — 10 мл стерильной желточной эмульсии FD045 на 90 мл среды.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы исследуемых образцов

• Клинический материал: кал, содержимое абсцессов и другие образцы.
• Пищевые образцы.

Сбор, подготовка и обработка образцов

Среду следует непосредственно инокулировать исследуемым образцом. Перед инокуляцией чашки со средой необходимо восстановить, поместив их в анаэробный контейнер на 18–24 ч.

Одновременно с исследуемым образцом следует инокулировать обогатительный бульон для выявления небольшого количества анаэробных микроорганизмов. Для выделения микроорганизмов необходимо руководствоваться стандартными процедурами.

Инкубацию следует проводить в течение 18–48 ч и продолжать до 7 суток. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют на среде с добавленной желточной эмульсией FD045 после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч. Чашки следует инкубировать до 7 суток, прежде чем считать результат отрицательным.

* Липазная активность может проявляться с задержкой; инкубацию следует продолжать до 7 суток.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: гель среднего янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• После добавления желточной эмульсии FD045: в чашках Петри образуется гель жёлтого цвета, непрозрачный.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,04 % при 25 °C.

pH: 7,5 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,30–7,70

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Ёмкость необходимо хранить плотно закрытой.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон следует плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Продукт гигроскопичен; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо герметично закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Ограничения применения

1. Липазная активность может проявляться с задержкой, поэтому чашки нельзя считать отрицательными до инкубации в течение одной недели.
2. Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на этой среде.
3. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Ожидаемые характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, соблюдении рекомендованной температуры хранения и использовании в пределах срока годности.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.