Основа желточного агара модифицированного HiMedia M1043-500G (уп/500 гр)

Основа желточного агара модифицированного HiMedia M1043-500G (уп/500 г) предназначена для идентификации анаэробных бактерий по их реакции с яичным желтком. Среда используется для выделения и обнаружения Clostridium perfringens в клинических образцах и пищевых продуктах; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения и интерпретация

Основа модифицированного желточного агара базируется на агаре Маккланга и Тоабе, а в качестве основы используется агар для анаэробов CDC (Центр по контролю и профилактике заболеваний). Это неселективная, высокообогащенная среда для культивирования облигатных анаэробов. Добавление эмульсии яичного желтка позволяет определить активность липазы и лецитиназы.

Компоненты среды:

• Триптон и соевый пептон: основные питательные вещества, источники углерода и азота.
• Экстракт дрожжей: витамины группы B.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
• L-цистин: аминокислота, выполняющая роль восстановителя.
• Витамин K₁ и гемин: стимулируют рост анаэробных организмов.

Интерпретация результатов:

• Лецитиназная активность: организмы расщепляют лецитин эмульсии яичного желтка, что приводит к образованию нерастворимого опалесцирующего (матового) осадка вокруг колоний.
• Липазная активность: расщепление свободных жирных кислот приводит к образованию радужного блеска на поверхности колоний.
• Протеолитическая активность: проявляется в виде зон просветления вокруг колоний.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 50,41 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 100 мл эмульсии яичного желтка (FD045) (или добавляйте 10 мл эмульсии на каждые 90 мл среды).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

• Типы образцов: клинический материал (кал, абсцессы и др.), образцы пищевых продуктов.
• Посев: инокулируйте среду исследуемым образцом напрямую.
• Подготовка: перед посевом чашки следует восстановить (снизить окислительный потенциал), поместив их в анаэробную банку на 18–24 часа.
• Обогащение: одновременно с посевом на агар рекомендуется использовать обогатительный бульон для обнаружения малого количества анаэробов.
• Инкубация: проводится в анаэробных условиях при 35–37 °C в течение 18–48 часов. Наблюдение следует продолжать до 7 суток.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.
  • После добавления эмульсии желтка (FD045): желтый непрозрачный гель.
• Реакция (pH 5,04 % водного раствора при 25 °C): 7,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении эмульсии яичного желтка (FD045) после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов. (Примечание: чашки следует инкубировать до 7 дней, прежде чем считать результат отрицательным).

Ограничения и требования к эксплуатации

Ограничения

• Липазная активность может проявляться с задержкой; результат нельзя считать отрицательным до истечения одной недели инкубации.
• Различные организмы имеют разные требования к росту и могут демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Каждая партия протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). Для специфических целей рекомендуется провести собственную валидацию среды.

Условия хранения и использования

• Сухая среда: хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Готовая среда: хранить при температуре 2–8 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в In Vitro диагностике.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.