Агар для теста на ДНКазу с толуидиновым синим HiMedia M1041-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Агар для теста на ДНКазу с толуидиновым синим HiMedia M1041-500G (уп/500 гр) производства HiMedia для выявления дезоксирибонуклеазной активности микроорганизмов, включая бактерии и грибы. Среда применяется преимущественно для идентификации стафилококков и содержит ДНК и толуидиновый синий для визуализации положительной реакции.

Назначение

Агар для определения дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов, особенно для идентификации стафилококков. Среда также используется для дифференциации и идентификации непигментированных видов Serratia, выделенных из клинических образцов и потенциально ошибочно идентифицируемых как представители родов Enterobacter и Klebsiella.

Тип питательной среды: диагностический
Назначение изделия: агар
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Тип образцов: пищевые продукты и молочные образцы

Состав

Состав, г/л:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Триптоза обеспечивает среду необходимыми питательными веществами. Фермент ДНКаза деполимеризует ДНК, в результате чего вокруг зоны роста микроорганизмов формируется прозрачная зона. Для визуализации реакции чашку можно залить соляной кислотой.

При добавлении толуидинового синего непосредственно в питательную среду активность ДНКазы проявляется ярко-розовой реакцией вследствие метахроматического свойства красителя.

Активность ДНКазы была обнаружена Weckman и Catlin у микроорганизмов рода Micrococcus; исследователи установили корреляцию с коагулазной активностью: коагулазоположительные виды также являлись ДНКазоположительными. Di Salvo подтвердил результаты Weckman и Catlin и наблюдал точную корреляцию активности ДНКазы и коагулазы. В эксперименте Di Salvo для активации фермента ДНКазы в среду были добавлены ДНК и хлорид кальция. Schreier модифицировал среду для определения ДНКазы добавлением толуидинового синего. Модифицированная среда обеспечила более быструю идентификацию Serratia marcescens и позволила дифференцировать Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Некоторые штаммы стафилококков могут подавляться на агаре для теста на ДНКазу из-за присутствия толуидинового синего.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,1 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами необходимо выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для идентификации необходимо выполнять дополнительные подтверждающие тесты.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-синего цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется синий прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,2 % при 25 °C.

pH раствора: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• Из-за гигроскопичности продукта при неправильном хранении возможно образование комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Оценка рабочих характеристик

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать действующие лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительный контекст

В отличие от среды для определения ДНКазы без красителя, состав M1041 включает толуидиновый синий, благодаря чему активность ДНКазы визуализируется ярко-розовой реакцией непосредственно в среде; при использовании среды без красителя прозрачную зону обычно выявляют после заливки чашки соляной кислотой.