Желчно-эскулиновый агар HiMedia M1035-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Желчно-эскулиновый агар HiMedia M1035-500G (уп/500 гр) с канамицином представляет собой порошковую селективную среду для выделения бактерий группы Bacteroides fragilis из смешанной микрофлоры. Среда применяется для предполагаемой идентификации анаэробных бактерий; инкубацию проводят при 35–37 °C в анаэробных условиях до 7 суток.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и предполагаемой идентификации бактерий группы Bacteroides fragilis из смешанной микрофлоры.

Тип образца: изолированный микроорганизм.

Состав

Состав на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту. Используемая желчь эквивалентна Oxgall.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки группы D содержат в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преимущественно нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, относятся к фекальным стрептококкам или энтерококкам.

Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричневато-чёрного осадка. Гидролиз эскулина используется для идентификации энтерококков. Желчно-эскулиновый агар первоначально был разработан для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Среда также позволяет дифференцировать стрептококки группы D от стрептококков, не относящихся к группе D.

Гидролиз эскулина на желчно-эскулиновом агаре может использоваться для дифференциации представителей Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae. Для идентификации энтерококков необходимо дополнительно провести другие тесты, включая определение устойчивости к соли.

Желчно-эскулиновый агар с канамицином представляет собой модификацию исходной рецептуры Swan. В обогащённую желчно-эскулиновую основу добавлены гемин и витамин K₁, которые обогащают среду и усиливают рост видов Bacteroides. Канамицин селективно поддерживает рост Bacteroides fragilis и подавляет рост факультативно-анаэробных и аэробных грамотрицательных палочек.

Анаэробы, неспособные гидролизовать эскулин, не образуют на среде коричневые или чёрные пигментированные колонии. Перед инкубацией посевы следует восстановить, выдержав чашки в анаэробном контейнере в течение 18–24 ч.

Желатиновый пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и необходимых питательных веществ для роста. Желчь и канамицин подавляют большинство сопутствующих бактерий. Эскулин гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, визуализируемого в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, способные вызывать инфекции у человека, также дают положительный тест на гидролиз эскулина в присутствии желчи. Для усиления роста энтерококков желчно-эскулиновый агар можно дополнить 50 мл/л лошадиной сыворотки.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. Не перегревайте среду.

Посев и инкубация

Образцы для анализа можно непосредственно штрихом высевать на поверхность чашки.

Инокулированные чашки необходимо сразу инкубировать в анаэробных условиях при 35–37 °C. Продолжительность инкубации составляет до 7 суток.

Для оценки культуральных характеристик инкубацию проводят в анаэробных условиях при 35–37 °C в течение 24–48 ч. При отсутствии роста инкубацию продолжают до 7 суток.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или коричневато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 4,46 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч; при отсутствии роста инкубацию продолжают до 7 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus также могут давать положительный результат теста на желчно-эскулиновый гидролиз.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Норма приготовления: 44,6 г/л
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин
• Режим автоклавирования: давление 15 фунтов/кв. дюйм, примерно 0,103 МПа
• Температура разливки: 45–50 °C
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Артикул: M1035-500G
• Упаковка: 500 г

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон
• Требования к помещению: сухое, вентилируемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения

Продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать, чтобы предотвратить образование комков. Неправильное хранение может привести к комкованию порошка. После каждого использования контейнер следует герметично закрывать. Рабочие характеристики среды сохраняются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности согласно действующим руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке