Желчно-эскулиновый агар HiMedia M1035-500G (уп/500 гр)

Селективная питательная среда Желчно-эскулиновый агар HiMedia M1035-500G (уп/500 гр) с канамицином. Рекомендуется для селективного выделения и предварительной идентификации бактерий группы Bacteroides fragilis из смешанной микрофлоры.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой модификацию классического состава Свона, обогащенную гемином и витамином K₁, которые стимулируют рост видов Bacteroides. Канамицин обеспечивает селективность, способствуя росту Bacteroides fragilis и подавляя развитие аэробных и факультативно-анаэробных грамотрицательных бацилл.

Основой идентификации является гидролиз эскулина:

1. Эскулин в составе среды гидролизуется до эскулетина и декстрозы.
2. Эскулетин вступает в реакцию с цитратом железа (III), образуя темно-коричневый или черный комплекс.
3. Результатом является появление зоны черного осадка вокруг колоний.

Анаэробы, не способные гидролизовать эскулин, не образуют пигментированных колоний. Слабоположительная реакция иногда наблюдается у стрептококков группы Viridans, а также у видов Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus. Для усиления роста энтерококков в среду можно добавить конский сывороточный раствор (50 мл/л).

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,1 ± 0,2.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 44,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Важно: не перегревать среду.

Процедура анализа

1. Посев: Изолированные микроорганизмы наносят штрихом непосредственно на поверхность агара.
2. Подготовка к инкубации: Перед инкубацией чашки следует поместить в анаэробную камеру (яру) на 18–24 часа для создания необходимых условий.
3. Инкубация: Инкубировать в анаэробных условиях при температуре 35–37 °C.
4. Срок анализа: Наблюдение за ростом продолжать до 7 суток.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до коричнево-желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком.
• Реакция: pH 4,46% водного раствора при 25 °C составляет 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают при анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч (при отсутствии роста — до 7 суток).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание комкования.
• Утилизация: использованные и загрязненные материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами и культурами использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, средства защиты глаз и лица) и соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Назначение: селективный агар для микробиологического анализа.