Основа анаэробного агара с колистином и налидиксовой кислотой HiMedia M1034-100G (уп/100 гр)

Питательная среда «Основа анаэробного агара с колистином и налидиксовой кислотой HiMedia M1034-100G (уп/100 гр)» — сухая основа селективной среды для выделения анаэробных стрептококков. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов, включая кал, мазки из носа и мазки из зева; после приготовления среду дополняют 5 % стерильной дефибринированной овечьей кровью.

Назначение

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип питательной среды: элективная
• Применение: селективное выделение анаэробных стрептококков из клинических и неклинических образцов
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Расход сухой основы: 44,14 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Компонент HM peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 44,14 г сухой основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду порциями по 100 мл.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении около 0,103 МПа (15 фунтов давления; примерно 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Асептически добавьте 5 мл стерильной дефибринированной овечьей крови на каждые 100 мл среды.
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Род Streptococcus включает широкий спектр патогенных и комменсальных грамположительных бактерий, обитающих у различных хозяев, включая человека, лошадей, свиней и коров. Стрептококки являются факультативными анаэробами и в организме хозяина часто колонизируют слизистые оболочки рта, носа и глотки; при определённых условиях могут также обнаруживаться на коже, в сердечной и мышечной ткани.

Стрептококки обычно относятся к требовательным микроорганизмам с высокими требованиями к питательным веществам. Агар Колумбия, разработанный Ellner и соавторами, предназначен для обильного роста различных требовательных микроорганизмов. Селективность среды обеспечивается добавлением колистина и налидиксовой кислоты. Агар Колумбия с колистином и налидиксовой кислотой при добавлении стерильной дефибринированной овечьей крови поддерживает обильный рост требовательных микроорганизмов, включая стрептококки, энтерококки и стафилококки.

Основа анаэробного агара с колистином и налидиксовой кислотой представляет собой модификацию основы агара Колумбия с колистином и налидиксовой кислотой с дополнительными обогащающими компонентами — витамином K₁ и гемином.

Функции компонентов среды:

• Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B служат источниками углерода, азота и необходимых питательных веществ.
• Кукурузный крахмал нейтрализует токсичные метаболиты.
• Декстроза служит источником углерода.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Дитиоэритритол и L-цистин способствуют созданию анаэробных условий.
• Витамин K₁ и гемин стимулируют рост анаэробных бактерий.
• Колистин ингибирует сопутствующие грамотрицательные кишечные бактерии за счёт нарушения целостности клеточной мембраны.
• Налидиксовая кислота ингибирует сопутствующие грамотрицательные кишечные бактерии за счёт блокирования репликации ДНК.

Чашки с анаэробным агаром с колистином и налидиксовой кислотой перед инокуляцией рекомендуется предварительно редуцировать: выдержать в анаэробных условиях в течение 18–24 ч. Образцы можно непосредственно штриховать по поверхности чашек.

Типы образцов

Для клинического применения используют:

• кал;
• мазки из носа;
• мазки из зева.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы сбора, транспортировки и обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными процедурами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия культивирования и ограничения

• Инкубируйте инокулированные чашки при 35–37 °C в анаэробных условиях в течение 48 ч.
• Отрицательные культуры инкубируйте 7 суток перед выдачей результата.
• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать различающиеся характеристики роста на этой среде.
• Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователь должен самостоятельно валидировать пригодность среды с учётом конкретных требований лаборатории.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: гель жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной овечьей крови: в чашках Петри образуется гель вишнёво-красного цвета, непрозрачный.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной овечьей крови и инкубации при 35–37 °C в течение 2–7 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните сухую основу и приготовленную среду при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей мик