HiMedia M1026-100G Рисовый экстракт агар

Питательная агаровая среда HiMedia M1026-100G Рисовый экстракт агар производства HiMedia предназначена для идентификации Candida albicans по образованию хламидоспор. Среда применяется для культивирования и дифференциации дрожжеподобных грибов, при этом добавление полисорбата 80 усиливает образование хламидоспор, но может вызывать аналогичную реакцию у других видов Candida.

Назначение и область применения

Рисовый экстракт агар применяют для идентификации Candida albicans по способности образовывать хламидоспоры.

Среда также используется:

• для стимуляции образования хламидоспор у Candida albicans и C. stellatoides;
• для дифференциации видов Candida, образующих хламидоспоры, от других видов Candida;
• с добавлением 2 % декстрозы — для стимуляции хромогенеза, то есть образования пигмента, при различении Trichophyton rubrum и Trichophyton mentagrophytes.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Состав на 1 л среды:

• Концентрация при приготовлении по основной методике: 40 г/л.
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Рисовый экстракт агар используют для идентификации и стимуляции образования хламидоспор у Candida albicans и C. stellatoides. Среда разработана Ташджианом для выявления видов Candida, образующих хламидоспоры, и дифференциации положительных видов от других видов Candida.

Рисовый экстракт обеспечивает питательные вещества, необходимые для роста видов Candida. Добавление полисорбата 80 стимулирует образование хламидоспор благодаря содержанию олеиновых кислот.

Исследования показали, что добавление полисорбата 80 к рисовому экстракту агару усиливает образование хламидоспор у C. albicans. Вместе с тем полисорбат 80 также способствует образованию хламидоспор у других видов Candida, поэтому для видовой идентификации требуется использование дополнительных питательных сред.

Образованию хламидоспор также способствует применение среды с более низкой концентрацией — 13 г/л; при этом среду можно готовить при повышенной концентрации 25 г/л.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40 г среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Добавьте 10 мл полисорбата 80.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика посева и анализа

1. Выполните посев инокуляционной петлёй, прорезая поверхность агара.
2. Инкубируйте инокулированную среду при 24–25 °C в течение 18–72 ч.
3. Исследуйте образование хламидоспор микроскопически при увеличении приблизительно ×100, фокусируясь на линии посева.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 24–25 °C в течение 18–72 ч.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от белого до светло-жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 4,0 % мас./об. при 25 °C; pH 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia.
• Артикул: M1026-100G.
• Назначение изделия: агаровая питательная среда.
• Физическая форма: порошок.
• Масса: 100 г.
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C; каталожный диапазон хранения: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Хранить в плотно закрытом контейнере.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Ограничения интерпретации

Полисорбат 80 усиливает образование хламидоспор у C. albicans, но может стимулировать их образование и у других видов Candida. Поэтому положительную реакцию нельзя использовать как единственный критерий видовой идентификации; для окончательного определения вида необходимо применять дополнительные среды и методы.

Сравнительный технический контекст

В отличие от среды без полисорбата 80, рисовый экстракт агар с добавлением 10 мл полисорбата 80 на 1000 мл среды стимулирует образование хламидоспор, однако одновременно повышает вероятность аналогичной реакции у других видов Candida.

Литературная основа методики

Методика опирается на работы Kelly и Funigiello (1959), Walker и Huppert (1960), Taschdjian (1953, 1957) и MacFaddin (1985).