HiMedia M1008-100G Агар с хлорамфениколом, дрожжевым экстрактом и глюкозой

Селективная питательная среда HiMedia M1008-100G (агар с хлорамфениколом, дрожжевым экстрактом и глюкозой) предназначена для количественного определения дрожжей и плесневых грибов в молоке и молочных продуктах. Среда содержит термостабильный антибиотик хлорамфеникол для подавления сопутствующей бактериальной флоры; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Агар с хлорамфениколом, дрожжевым экстрактом и глюкозой является селективной средой для выделения и подсчёта грибов (дрожжей и плесеней) в молочных продуктах. Состав среды обеспечивает оптимальный рост целевых микроорганизмов:

• Дрожжевой экстракт: источник азотистых питательных веществ и витаминов комплекса B.
• Декстроза (глюкоза): основной источник энергии.
• Хлорамфеникол: термостабильный антибиотик, который подавляет рост бактерий, что увеличивает срок годности готовой среды (до 4 месяцев и более).

Методика соответствует рекомендациям комитета ISO по подсчёту дрожжей и плесеней.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура посева и инкубации

1. Внесите 1 мл пробы (для жидких образцов) или 1 мл первичной суспензии (для других продуктов) в две стерильные чашки Петри.
2. Внесите 1 мл разведения $10^{-1}$ (или $10^{-2}$ для определенных продуктов) в следующие две стерильные чашки. При необходимости повторите процедуру для более высоких разведений.
3. Залейте каждую чашку примерно 15 мл расплавленного агара, поддерживаемого при температуре 45 $\pm$ 1 °C.
4. Время между приготовлением первичной суспензии и заливкой среды не должно превышать 15 минут.
5. Аккуратно перемешайте инокулят со средой и дайте ей затвердеть.
6. Подготовьте контрольную чашку для проверки стерильности.
7. Инкубируйте чашки при температуре 25 $\pm$ 1 °C.

Интерпретация результатов

Подсчёт колоний проводится после 3, 4 и 5 дней инкубации. Для дифференциации колоний дрожжей, плесеней и бактерий необходимо провести микроскопическое исследование.

• Дрожжи: гладкие, влажные колонии с выпуклой поверхностью. Рекомендуется проводить подсчёт на 3-и сутки, так как позже они могут быть перекрыты ростом плесени.
• Плесени: характеризуются обильным ростом гиф.
• Ингибирование плесени: если требуется подсчёт только дрожжей, при приготовлении чашек в среду добавляют 0,25 % стерильного раствора пропионата натрия.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,6 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,49 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция 4,0 % водного раствора при 25 °C: pH 6,6 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 22–25 °C в течение 2–5 суток.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: пищевые и молочные продукты.
• Ограничения: для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.