Питательная селективная среда HiMedia M1008-100G «Агар с хлорамфениколом, дрожжевым экстрактом и глюкозой» — порошкообразный агар для микробиологического анализа. HiMedia M1008-100G применяют для селективного выявления и количественного определения дрожжей и плесневых грибов в молоке и молочных продуктах; готовая среда имеет pH 6,6 ± 0,2.

Назначение

Среда предназначена для выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов в пищевых и молочных образцах. Методика основана на подавлении сопутствующей бактериальной микрофлоры хлорамфениколом.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия

Агар с хлорамфениколом, дрожжевым экстрактом и глюкозой представляет собой селективную питательную среду для выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов в молоке и молочных продуктах. Среда рекомендована комитетом ISO для количественного определения дрожжей и плесневых грибов.

• Дрожжевой экстракт обеспечивает среду азотистыми питательными веществами и витаминами группы B.
• Декстроза служит источником энергии.
• Хлорамфеникол — термостабильный антибиотик, подавляющий сопутствующую бактериальную флору.
• Подавление бактериального роста увеличивает срок хранения приготовленной среды; приготовленная среда может использоваться в течение не менее 4 месяцев.

Приготовление среды

1. Взвесьте 40,0 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика проведения анализа

1. Возьмите две стерильные чашки Петри.
2. Перенесите в каждую чашку по 1 мл образца, если образец жидкий, или по 1 мл исходной суспензии для других видов продуктов.
3. Возьмите ещё две стерильные чашки Петри и внесите в каждую по 1 мл разведения 10⁻¹. Для других продуктов внесите по 1 мл разведения 10⁻² в каждую стерильную чашку Петри.
4. При необходимости повторите процедуру с последующими разведениями.
5. Внесите примерно 15 мл предварительно расплавленной среды с хлорамфениколом, дрожжевым экстрактом и глюкозой, поддерживаемой при температуре 45 ± 1 °C.
6. Время от окончания приготовления исходной суспензии до момента заливки среды в чашки не должно превышать 15 мин.
7. Осторожно перемешайте посевной материал со средой и оставьте до полного застывания.
8. Приготовьте контрольную чашку для проверки стерильности среды.
9. Инкубируйте чашки при температуре 25 ± 1 °C.
10. Подсчитайте колонии на каждой чашке после 3, 4 и 5 суток инкубации.
11. Проведите микроскопическое исследование для различения колоний дрожжей, плесневых грибов и бактерий по их морфологии.

Чашки рекомендуется осматривать по завершении 3 суток инкубации для подсчёта колоний дрожжей, поскольку последующие плесневые колонии могут их перерасти.

• Колонии дрожжей подсчитывают отдельно; они характеризуются гладкой, влажной, приподнятой поверхностью.
• Колонии плесневых грибов распознают по обильному росту гиф.
• Если требуется определить только количество дрожжей, при приготовлении чашек в среду добавляют 0,25 % стерильного раствора пропионата натрия для подавления роста плесневых грибов.

Тип образцов

Тип образцов: пищевые и молочные продукты.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяют соответствующие методы отбора и подготовки проб в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,49 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 4,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 6,6 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 22–25 °C в течение 2–5 суток.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм был известен как Aspergillus niger.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта в плотно закрытой ёмкости: 15–25 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

Для окончательного подтверждения результатов необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Меры безопасности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила микробиологической безопасности при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установлен