Питательная агаризованная среда HiMedia M1007-100G KF агар для стрептококков с BCP предназначена для обнаружения и количественного определения фекальных стрептококков в клинических, пищевых и водных образцах. Среда содержит селективный азид натрия и индикатор бромкрезоловый пурпурный (BCP), а предполагаемая идентификация колоний требует подтверждающих тестов.

Назначение и область применения

KF-агар рекомендован для обнаружения и количественного определения фекальных стрептококков в клинических образцах, пищевых продуктах и воде.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы воды.

Состав

Концентрация компонентов приведена в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров среды.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки — шаровидные грамположительные бактерии, входящие в состав нормальной комменсальной микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Фекальные стрептококки, обнаруживаемые в фекалиях, включают стрептококки с антигенами группы D по классификации Lancefield. К этой группе относятся Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, Streptococcus bovis и Streptococcus duran.

Фекальные стрептококки являются патогенами низкой вирулентности и редко вызывают заболевания, однако могут быть причиной:

• инфекций мочевыводящих путей у пациентов с катетерами;
• смешанных инфекций брюшных ран после операций на кишечнике;
• эндокардита при патологически изменённых клапанах сердца.

Среда Kenner–Faecal (KF) разработана для обнаружения стрептококков в воде и пищевых продуктах. Протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают фекальные стрептококки источниками азота, углерода, серы, аминокислот, витаминов и микроэлементов. Лактоза и мальтоза являются ферментируемыми углеводами и служат источниками энергии.

Азид натрия действует как селективный агент, подавляющий рост грамотрицательных бактерий. 2,3,5-трифенилтетразолий хлорид (TTC) активно метаболизирующие клетки восстанавливают до нерастворимого формазана, в результате чего формируются розовые или красные колонии.

Бактерии, устойчивые к азиду, утилизируют лактозу и/или мальтозу. Образующаяся при этом кислота изменяет цвет индикаторного красителя на жёлтый. Восстановление TTC бактериальными клетками до нерастворимого формазана приводит к образованию колоний от розового до красного цвета.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 76,41 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду. Перегрев снижает pH и ухудшает ростовые свойства среды.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте к стерильной среде 10 мл 1%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолий хлорида (TTC), артикул FD057.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Посев и обработка образцов

Образцы можно непосредственно высевать штриховым методом. Для анализа воды допускается асептическое размещение на среде стерильных мембранных фильтров, через которые предварительно пропущен образец воды.

Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Энтерококки при этом проявляются в виде колоний от розового до красного цвета. Такая идентификация является предположительной; после неё необходимо выполнить дополнительные подтверждающие тесты.

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Технические характеристики

• Полное название: KF агар для стрептококков с BCP.
• Модель/артикул: M1007-100G.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: агаризованная питательная среда.
• Физическая форма: порошок.
• Масса: 100 г.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Рабочий диапазон хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH по контролю качества: 7,00–7,40.
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 7,64 % м/о при 25 °C.
• Добавляемый реагент: 10 мл 1%-ного раствора TTC FD057 на приготовленную среду.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Однородный, свободно текущий порошок кремового или серовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакция 7,64%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Контрольный диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления реагента FD057 и инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM.

• — ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

KF-среда разработана для обнаружения фекального загрязнения воды и не предназначена для специфической предполагаемой идентификации стрептококков группы D. Для подтверждения видовой принадлежности Streptococcus необходимо проводить дополнительные тесты совместно с использованием KF-среды.

Условия эксплуатации, хранения и срок годности

• Храните сухую среду при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде; для предотвращения образования комков плотно закрывайте флакон.
• Порошок обладает гигроскопичностью, поэтому при ненадлежащем хран