HiMedia M1005F-500G Основа агара S.F.P.

Основа сухой питательной среды HiMedia M1005F-500G S.F.P. Агар для идентификации и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Применяется в соответствии с методикой FDA BAM (1998); вес упаковки 500 г.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения Clostridium perfringens — грамположительных анаэробных спорообразующих бактерий, вызывающих пищевые отравления. Высокая селективность достигается за счет использования эмульсии яичного желтка и D-циклосерина (в составе добавки), которые подавляют рост конкурирующей микрофлоры.

Триптоза, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают организм азотом, углеродом и серой. Способность C. perfringens восстанавливать сульфиты приводит к образованию черных колоний. Активность лецитиназы вызывает образование непрозрачной белой зоны (диаметром 2–4 мм) вокруг колонии в среде с яичным желтком.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 23,5 г порошка в 460 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 50 °C.
5. Добавить 40 мл эмульсии яичного желтка (FD045F) и содержимое 1 флакона добавки T.S.C. (FD014).
6. Тщательно перемешать перед розливом в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

1. Пробоподготовка: 25 г образца асептически смешать с 225 мл пептонного раствора для получения суспензии 1:10. Приготовить серию разведений до $10^{-6}$.
2. Посев (метод слоев):
   • В чашки Петри (100 $\times$ 15 мм) налить 6–7 мл основы S.F.P. агара без яичного желтка.
   • В центр каждой чашки внести по 1 мл соответствующего разведения.
   • Залить поверх инокулята дополнительными 15 мл основы S.F.P. агара (без желтка или с 50 % эмульсией желтка), аккуратно перемешав содержимое вращением.
3. Альтернативный метод (для продуктов с сульфатредуцирующими организмами):
   • 0,1 мл разведения распределить по поверхности поверхности агара TSC с эмульсией желтка.
   • После впитывания инокулята (около 5 мин) залить поверхность 10 мл агара TSC без эмульсии желтка.
4. Инкубация: Инкубировать в анаэробных условиях согласно протоколу BAM.
5. Учет: Подсчитать чашки, содержащие от 20 до 200 черных колоний.

Интерпретация результатов

• Положительный результат: черные колонии с непрозрачной белой зоной вокруг (результат лецитиназной активности).
• Ограничения: Факультативные анаэробы с положительной лецитиназной активностью могут сделать среду полностью непрозрачной, маскируя реакцию C. perfringens. Другие организмы могут образовывать черные колонии.
• Подтверждение: Предварительные колонии C. perfringens подлежат подтверждению тестами на подвижность, восстановление нитратов и разжижение желатина.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Конечный pH (при 25 °C): 7,6 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Свойства геля: плотный, сопоставим с 2,0 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность: базальный гель янтарного цвета, слегка опалесцирующий; после добавления эмульсии желтка — желтый непрозрачный гель

Состав, г/л:

Дополнительные спецификации

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч в анаэробных условиях с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045) и добавки S.F.P. (FD013).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.