Основа агара S.F.P. для C.perfringens HiMedia M1005-500G (уп/500 гр)

Основа агара S.F.P. для C. perfringens HiMedia M1005-500G (уп/500 гр) предназначена для предварительной идентификации и количественного учёта Clostridium perfringens в пищевых продуктах. При добавлении селективной добавки и обогатителя среда обеспечивает высокую степень избирательности за счёт использования канамицина и полимиксина B.

Принцип измерения и интерпретация

Среда подготовлена по формуле Шахиди и Фергюсона (S.F.P.). Она позволяет идентифицировать лецитиназную реакцию и реакцию восстановления сульфита.

Основные компоненты и их функции:

• Триптоза, папаиновый гидролизат соевой муки и дрожжевой экстракт: обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу, витамины комплекса B и другие вещества, необходимые для роста клостридий.
• Бисфит натрия и цитрат аммония железа (III): служат индикаторами восстановления сульфита C. perfringens, что приводит к образованию чёрных колоний.
• Канамицин и полимиксин B (добавка FD013): подавляют рост конкурирующей микрофлоры, обеспечивая более эффективное выделение вегетативных клеток и спор C. perfringens по сравнению с использованием только полимиксина B или сульфадиазина.
• Эмульсия желтка яйца (FD045): используется для выявления лецитиназной активности; некоторые штаммы C. perfringens образуют непрозрачную зону вокруг колонии.

Важное ограничение: Другие микроорганизмы, кроме C. perfringens, также могут образовывать чёрные колонии. Для подтверждения результатов необходимо проведение теста на подвижность, восстановление нитратов и разжижение желатина.

Методика проведения анализа

Для изоляции и подсчёта C. perfringens из пищевых продуктов:

1. Нанесите на поверхность среды 0,1 мл десятикратных разведений образца в пептонной воде (M028).
2. Дайте поверхности среды подсохнуть в течение 5–10 минут.
3. Покройте поверхность 10 мл агара без эмульсии желтка яйца и дайте ему застыть.
4. Инкубируйте при 37 °C в течение 20–24 часов в анаэробных условиях.
5. Для предварительного подсчёта выберите и подсчитайте крупные чёрные колонии, окружённые непрозрачной зоной.

Приготовление среды

1. Растворите 23,5 г порошка в 475 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50 °C.
5. Добавьте 25 мл эмульсии желтка яйца (FD045) и содержимое 1 флакона добавки S.F.P. (FD013).
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,6 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80

Физико-химические свойства

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: базовая среда представляет собой янтарный слегка опалесцирующий гель. После добавления эмульсии желтка яйца в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов в анаэробных условиях с добавлением эмульсии желтка яйца (FD045) и добавки S.F.P. (FD013).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Назначение: основа питательной среды.