Питательная агаровая среда «Висмут-сульфит агар HiMedia M1004-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других Salmonella; конечный pH среды составляет 7,6 ± 0,2. Среда применяется при анализе патологического материала, сточных и питьевых вод, пищевых и молочных продуктов, но не должна использоваться как единственная селективная среда из-за возможного ингибирования отдельных штаммов Salmonella.

Назначение

Висмут-сульфит агар модифицированный предназначен для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других Salmonella из следующих типов образцов:

• клинический материал: кровь, фекалии и другие патологические образцы;
• пищевые и молочные продукты;
• образцы воды;
• патологический материал, сточные воды и источники питьевого водоснабжения.

Клинические образцы можно непосредственно высевать на висмут-сульфит агар. Для пищевых образцов перед посевом проводят предварительное обогащение.

Состав

Состав, г/л:

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Salmonellae представляют собой наиболее таксономически сложную группу бактерий среди Enterobacteriaceae. Инфицирование человека бактериями рода Salmonella чаще всего происходит при употреблении пищи, воды или молока, загрязнённых экскрементами человека или животных. Человек является единственным резервуаром для S. Typhi.

Различают четыре клинических типа сальмонеллёзных инфекций:

• гастроэнтерит;
• бактериемия или септицемия;
• энтерическая лихорадка;
• носительство.

Висмут-сульфит агар модифицированный является модификацией исходной формулы среды Вильсона—Блэра. Среда также рекомендована для выделения Salmonella Typhi и других Salmonella.

S. Typhi, S. Enteritidis и S. Typhimurium обычно формируют чёрные колонии с окружающим металлическим блеском. Окрашивание связано с образованием сероводорода и восстановлением сульфита до чёрного сульфида железа. Salmonella Paratyphi A формирует светло-зелёные колонии.

Shigella в основном ингибируется на этой среде; исключение составляют S. flexneri и S. sonnei. Среда также ингибирует некоторые виды Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi.

Висмут-сульфит агар допускает использование большей посевной дозы по сравнению с другими селективными средами благодаря специфическому ингибирующему действию на грамположительные бактерии и колиформы.

Функции компонентов:

• пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, витаминов и необходимых факторов роста;
• декстроза (глюкоза) является источником углерода;
• гидрофосфат натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• индикатор сульфита висмута и бриллиантовый зелёный ингибируют кишечные грамположительные и грамотрицательные бактерии;
• сульфат железа способствует выявлению образования сероводорода.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду: это разрушает её селективность.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Равномерно диспергируйте выпавший осадок сульфита висмута.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения выпавшего сульфита висмута в готовом геле. Осадок необходимо диспергировать до разливания среды в стерильные чашки Петри.

Подготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Не автоклавируйте и не перегревайте среду: это разрушает её селективность.
2. S. Typhi образует типичные коричневые колонии с металлическим блеском или без него.
3. Среда обладает высокой селективностью и должна применяться параллельно с менее селективными средами.
4. Для некоторых видов Salmonella типичные чёрные колонии с металлическим блеском наблюдаются в зоне плотного посева, тогда как изолированные колонии могут быть зелёными.
5. Shigella в основном ингибируется на этой среде; исключение составляют S. flexneri и S. sonnei.
6. Некоторые виды Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi, также ингибируются.
7. Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения выпавшего сульфита висмута в готовом геле. Осадок необходимо диспергировать до разливания среды в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,27%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется зеленовато-жёлтая опалесцирующая среда с хлопьевидным осадком.

Реакция

Реакция 4,0%-ного водного раствора, измеренная при 25 °C: pH 7,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• После открытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Приготовленную среду хранить при температуре 20–30 °C не более 2 суток.
• По истечении 2 суток краситель окисляется, среда приобретает зелёную окраску и может ингибировать некоторые виды Salmonella.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• Эффективность среды сохраняется при применении