Питательная микробиологическая среда HiMedia M1004-100G «Модифицированный висмут-сульфитный агар» — сухой селективный агар в порошке для выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других Salmonella. Среда предназначена для анализа патологического материала, сточных вод, питьевой воды, пищевых и молочных продуктов, при этом должна применяться параллельно с менее селективными средами из-за возможного ингибирования отдельных штаммов сальмонелл.

Назначение

Модифицированный висмут-сульфитный агар рекомендуется для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других Salmonella из следующих типов образцов:

• клинический материал: кровь, фекалии и другой патологический материал;
• пищевые и молочные продукты;
• вода, включая питьевую воду и сточные воды.

Клинические образцы можно непосредственно засевать на висмут-сульфитный агар. Для пищевых образцов перед посевом выполняют предварительное обогащение.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих параметров.

Эквивалент экстракта говядины.

Принцип действия и интерпретация

Salmonella относятся к наиболее таксономически сложной группе бактерий семейства Enterobacteriaceae. Инфицирование человека Salmonella чаще всего происходит при употреблении пищи, воды или молока, загрязнённых человеческими либо животными экскрементами. Единственным резервуаром S. Typhi являются люди.

Различают четыре клинических типа сальмонеллёзных инфекций:

• гастроэнтерит;
• бактериемия или септицемия;
• кишечная лихорадка;
• носительство.

Среди различных питательных сред, применяемых для выделения и предварительной идентификации Salmonella, особенно Salmonella Typhi, висмут-сульфитный агар обеспечивает выраженное восстановление целевых микроорганизмов.

Модифицированный висмут-сульфитный агар представляет собой вариант исходной среды Вильсона—Блэра. Среда также рекомендуется для выделения Salmonella Typhi и других видов Salmonella.

S. Typhi, S. Enteritidis и S. Typhimurium обычно формируют чёрные колонии с окружающим металлическим блеском. Окраска обусловлена образованием сероводорода и восстановлением сульфита до чёрного сульфида железа. Salmonella Paratyphi A формирует светло-зелёные колонии.

Среда может ингибировать некоторые штаммы видов Salmonella, поэтому не должна использоваться в качестве единственной селективной среды для выделения этих микроорганизмов.

Виды Shigella в основном ингибируются на этой среде; исключения составляют S. flexneri и S. sonnei. Также ингибироваться могут отдельные виды Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi.

По сравнению с другими селективными средами модифицированный висмут-сульфитный агар допускает использование большей посевной дозы. Среда обладает избирательным ингибирующим действием в отношении грамположительных бактерий и колиформных бактерий.

Функции компонентов:

• пептон и HM-пептон B являются источниками углерода, азота, витаминов и необходимых факторов роста;
• декстроза (глюкоза) служит источником углерода;
• двузамещённый гидрофосфат натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• индикатор сульфита висмута и бриллиантовый зелёный ингибируют кишечные грамположительные и грамотрицательные бактерии;
• сульфат железа способствует выявлению образования сероводорода.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду: перегрев разрушает её селективность.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Равномерно распределите выпавший в осадок сульфит висмута.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения осаждённого сульфита висмута в готовом геле. Осадок необходимо диспергировать до разливания среды в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,27%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется опалесцирующая среда зеленовато-жёлтого цвета с хлопьевидным осадком.

Реакция

Реакция 4,0%-ного водного раствора, измеренная при 25 °C: pH 7,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

1. Не автоклавируйте и не перегревайте среду: перегрев разрушает её селективность.
2. S. Typhi образует типичные коричневые колонии, которые могут иметь или не иметь металлический блеск.
3. Среда обладает высокой селективностью и должна использоваться параллельно с менее селективными средами для выделения целевых микроорганизмов.
4. Для некоторых видов Salmonella типичные чёрные колонии с металлическим блеском наблюдаются вблизи участков с плотным посевом, тогда как изолированные колонии могут быть зелёными.
5. Виды Shigella в основном ингибируются на этой среде; исключения составляют S. flexneri и S. sonnei.
6. Некоторые виды Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi, также ингибируются.
7. Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения осаждённого сульфита висмута в готовом геле. Сульфит висмута необходимо диспергировать до разливания среды в стерильные чашки Петри.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C не более 2 суток. По истечении этого времени краситель окисляется, среда приобретает зелёную окраску и может ингибировать некоторые виды Salmonella.

Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы