Основа триптозного кровяного агара HiMedia M097-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа триптозного кровяного агара HiMedia M097-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — порошковая основа для приготовления кровяного агара с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения прихотливых микроорганизмов и определения гемолитических реакций; для приготовления среды требуется асептическое добавление 5 % стерильной дефибринированной крови.

Назначение

Основа триптозного кровяного агара предназначена для:

• выделения прихотливых микроорганизмов после добавления крови;
• определения гемолитических реакций микроорганизмов;
• культивирования микроорганизмов на универсальной питательной среде без добавления крови;
• поддержания чистых культур Salmonella для серологических исследований.

Тип питательной среды: базовый, диагностический.
Назначение изделия: основа.
Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
Рекомендуемые образцы: клинические образцы мочи и кожных поражений, пищевые образцы.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Для приготовления кровяного агара охладите автоклавированную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Основа триптозного кровяного агара представляет собой среду на основе триптозы, предназначенную для культивирования прихотливых микроорганизмов после обогащения кровью.

Среда не содержит декстрозу, поэтому подходит для определения гемолитических реакций. Кровь обеспечивает дополнительные питательные вещества и служит субстратом для изучения гемолиза. Среда сохраняет эритроциты в подходящем состоянии и способствует формированию отчётливых зон гемолиза.

Триптоза и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы азотистыми и углеродсодержащими соединениями, серой, комплексом витаминов группы B и микроэлементами, необходимыми для бактериального метаболизма.

Различают четыре типа гемолиза:

1. Альфа-гемолиз: частичный лизис эритроцитов вокруг колонии с образованием серо-зелёного или коричневатого окрашивания среды.
2. Бета-гемолиз: полный лизис эритроцитов вокруг колонии с формированием зоны просветления среды за счёт удаления крови.
3. Гамма-гемолиз: отсутствие гемолиза и, соответственно, отсутствие изменения окраски среды вокруг колонии. Микроорганизмы без гемолиза обычно называют негемолитическими, а не гамма-гемолитическими.
4. Альфа-прим или альфа-гемолиз с широкой зоной: небольшая зона неповреждённых эритроцитов непосредственно рядом с колонией, окружённая зоной полного гемолиза эритроцитов. Такой тип гемолиза можно принять за бета-гемолиз.

Для окончательной идентификации необходимо выполнять биохимические тесты.

Согласно бактериологическому аналитическому руководству FDA (FDA BAM), чистые культуры Salmonella поддерживают на основе триптозного кровяного агара для серологических исследований.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте подходящие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

Для клинических образцов применяйте подходящие методы обращения с образцами в соответствии с утверждёнными лабораторными процедурами и руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Тип питательной среды: базовый.
Тип питательной среды: диагностический.
Масса продукта: 500 г.
Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.
Форма: однородный, свободно сыпучий порошок.

Желирование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5-процентным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 3,3 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде вариабельные характеристики роста.
2. Для полной идентификации необходимо проводить биохимические и серологические исследования колоний чистой культуры.

Условия эффективности

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Порошок обладает гигроскопичностью; нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом, проветриваемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.