Основа триптозного кровяного агара HiMedia M097-500G (уп/500 гр)

Основа триптозного кровяного агара HiMedia M097-500G (уп/500 гр) производства HiMedia представляет собой базовую диагностическую питательную среду. Применяется для выделения прихотливых микроорганизмов и определения гемолитических реакций; состав соответствует методическим рекомендациям Роспотребнадзора МР 02.009-06.

Принцип измерения и интерпретация

Основа триптозного кровяного агара представляет собой среду на основе триптозы, которая при добавлении крови используется для культивирования прихотливых микроорганизмов. Среда не содержит декстрозы, что делает её эффективной для определения типов гемолиза. Триптоза и пептон HM B обеспечивают необходимые азотистые и углеродные соединения, серу, витамины комплекса B и микроэлементы, важные для метаболизма бактерий. Добавление крови обеспечивает дополнительные питательные вещества и служит базой для изучения гемолитических реакций, способствуя формированию четких зон гемолиза.

Согласно FDA BAM, чистые культуры Salmonella поддерживают на данной основе для последующего серологического тестирования.

Типы наблюдаемого гемолиза:

1. Альфа-гемолиз: частичный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий серо-зеленое или коричневатое обесцвечивание среды.
2. Бета-гемолиз: полный лизис эритроцитов вокруг колонии, приводящий к просветлению среды.
3. Гамма-гемолиз: отсутствие гемолиза и изменения цвета среды вокруг колонии (такие организмы называют негемолитическими).
4. Альфа-штрих (широкая зона альфа): небольшая зона неповрежденных эритроцитов непосредственно у колонии, окруженная зоной полного гемолиза.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: моча, поражения кожи.
• Образцы пищевых продуктов.

Методика приготовления

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 33,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Приготовление кровяного агара

1. Охладить стерилизованную базовую среду до 45–50 °C.
2. В асептических условиях добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
3. Тщательно перемешать, избегая образования пузырьков воздуха.
4. Разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

• Сертификат: ФСЗ 2009/03707.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: непрозрачный гель вишнево-красного цвета.
• Реакция: pH 3,3 % водного раствора при 25 °C составляет 7,2 $\pm$ 0,2 (диапазон 7,00–7,40).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Меры предосторожности: только для профессионального использования (In Vitro диагностика). При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Требования к росту могут варьироваться в зависимости от индивидуальных особенностей штаммов микроорганизмов.
2. Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов на колониях чистой культуры.