HiMedia M097-100G Основа триптозно-кровяного агара

Основа питательной среды HiMedia M097-100G «Основа триптозно-кровяного агара» производства HiMedia — порошковая среда с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций; для приготовления кровяного агара в среду добавляют 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

Назначение

Основа триптозно-кровяного агара предназначена для:

• выделения требовательных микроорганизмов;
• определения гемолитических реакций;
• приготовления кровяного агара с добавлением стерильной дефибринированной крови;
• культивирования микроорганизмов как универсальная питательная среда без добавления крови;
• поддержания чистых культур Salmonella для серологических исследований.

Состав

Пептон HM B эквивалентен экстракту говядины. Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Основа представляет собой среду на основе триптозы, которую используют для культивирования требовательных микроорганизмов после добавления крови. Среда не содержит декстрозу, поэтому подходит для определения гемолитических реакций.

Триптоза и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы азотистыми и углеродсодержащими соединениями, серой, витаминами группы B и микроэлементами, необходимыми для бактериального метаболизма. Кровь служит дополнительным источником питательных веществ и основой для изучения гемолитических реакций. Среда поддерживает эритроциты в пригодном для анализа состоянии и способствует формированию отчётливых зон гемолиза.

Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проводить биохимические тесты. Согласно FDA BAM, чистые культуры Salmonella поддерживают на основе триптозно-кровяного агара для серологических исследований.

Типы гемолиза

1. Альфа-гемолиз: частичный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий серо-зелёное или коричневатое окрашивание среды.
2. Бета-гемолиз: полный лизис эритроцитов вокруг колонии, приводящий к просветлению среды за счёт разрушения крови.
3. Гамма-гемолиз: отсутствие гемолиза и, соответственно, отсутствие изменения цвета среды вокруг колонии. Микроорганизмы без гемолиза обычно называют негемолитическими, а не гамма-гемолитическими.
4. Альфа-прим или широкозонный альфа-гемолиз: небольшая зона неповреждённых эритроцитов непосредственно рядом с колонией, окружённая зоной полного гемолиза эритроцитов. Такой тип гемолиза можно ошибочно принять за бета-гемолиз.

Методика приготовления среды

1. Взвесить 33,0 г порошка и суспендировать в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Для приготовления кровяного агара охладить автоклавированную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешать, избегая образования воздушных пузырьков.
7. Разлить среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: моча, материал из кожных поражений.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам. Для клинических образцов следует использовать соответствующие методы обращения с материалом согласно принятым лабораторным процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитать маркировку.
• При работе использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковый характер роста на этой среде.
2. Для полной идентификации необходимо проводить биохимические и серологические тесты на колониях чистой культуры.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 3,3%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики определены для среды с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Вес: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Условия хранения и срок годности

Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.

Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, поскольку гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование.

Хранить в сухом проветриваемом помещении