HiMedia M097-100G Основа триптозно-кровяного агара

Основа триптозно-кровяного агара HiMedia M097-100G предназначена для изоляции требовательных к питанию микроорганизмов и определения гемолитических реакций. Среда используется для анализа клинических образцов (моча, поражения кожи) и проб пищевых продуктов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Основа триптозно-кровяного агара представляет собой среду на базе триптозы, которая при добавлении крови используется для культивирования требовательных микроорганизмов. Среда не содержит декстрозы, что делает её эффективным инструментом для изучения гемолитических реакций. Согласно руководству FDA BAM, на данной основе поддерживают чистые культуры Salmonella для проведения серологических тестов.

Триптоза и пептон HM B обеспечивают бактерии необходимыми азотистыми и углеродными соединениями, серой, витаминами комплекса B и микроэлементами. Добавление крови обогащает среду питательными веществами и позволяет дифференцировать четыре типа гемолиза:

1. Альфа-гемолиз: частичный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий серо-зелёное или коричневатое обесцвечивание среды.
2. Бета-гемолиз: полный лизис эритроцитов, приводящий к прозрачности среды вокруг колонии.
3. Гамма-гемолиз: отсутствие гемолиза и изменения цвета среды; такие организмы называют негемолитическими.
4. Альфа-штрих (широкая зона альфа): небольшая зона неповрежденных эритроцитов непосредственно у колонии, окруженная зоной полного лизиса.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Методика приготовления

Приготовление базовой среды

1. Суспендируйте 33,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Приготовление кровяного агара

1. Охладите стерилизованную базовую среду до 45–50 °C.
2. В асептических условиях добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
3. Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха.
4. Разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность (базовая среда): жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Цвет и прозрачность (с 5 % кровью): непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают при добавлении 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Для полной идентификации микроорганизмов требуется проведение дополнительных биохимических и серологических тестов на чистых культурах.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Только для профессионального использования (In Vitro диагностика). При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и используйте средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены путем автоклавирования или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами.