Питательная агаризованная среда HiMedia M096F-500G Картофельно-декстрозный агар с 2% агара предназначена для микробиологического культивирования дрожжей и плесневых грибов и имеет конечный pH 5,6 ± 0,2. Среда применяется для выделения и количественного учёта грибов в пищевых и молочных продуктах; угнетение бактериального роста достигается подкислением среды стерильной 10% винной кислотой до pH 3,5.

Назначение и область применения

Картофельно-декстрозный агар с 2% агара рекомендован для выделения и количественного учёта дрожжей и плесневых грибов из молочных и других пищевых продуктов в соответствии с Бактериологическим аналитическим руководством FDA (FDA BAM), 1998.

Тип образцов: пищевые продукты.

Среда также применяется для:

• стимуляции спорообразования;
• поддержания маточных культур;
• дифференциации типичных разновидностей дерматофитов по образованию пигмента;
• выделения отдельных колоний грибов с последующей видовой идентификацией при необходимости.

Разбавление с высевом на чашки и прямой высев являются основными методами выделения и количественного учёта грибов. Прямой высев эффективнее разбавления при обнаружении отдельных видов плесневых грибов, включая большинство продуцентов токсинов, но менее эффективен для выявления дрожжей.

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Эквивалентно картофельному настою из указанного количества картофеля.

Принцип действия и интерпретация

Картофельный настой и декстроза обеспечивают интенсивный рост грибов. Подкисление среды винной кислотой до pH 3,5 подавляет рост бактерий.

При нагревании уже подкисленной среды может происходить гидролиз агара, из-за чего среда теряет способность к затвердеванию. После добавления кислоты среду нельзя нагревать.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 44,0 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Перед разливом тщательно перемешайте.
6. Для специальных исследований, требующих pH 3,5, подкислите среду стерильной 10% винной кислотой. На каждые 100 мл стерильной охлаждённой среды требуется приблизительно 1 мл кислоты.
7. После добавления кислоты не нагревайте среду.

Пробоподготовка и проведение анализа

1. Добавьте 25–50 г образца в 0,1% пептонную воду для получения разведения 10⁻¹.
2. Гомогенизируйте образец в стомачере в течение 2 мин или смешивайте в блендере в течение 30–60 с.
3. Приготовьте необходимые последовательные разведения в 0,1% пептонной воде. В обычных условиях для анализа достаточно разведения до 10⁻⁶.
4. При использовании метода поверхностного посева внесите 0,1 мл образца на основу среды Дихлоран–глицериновая среда с розовым бенгальским/дихлораном (M1000).
5. При использовании метода глубинного посева внесите 1 мл образца в основу дихлоран–глицериновой среды (M1129).
6. Инкубируйте посевы при 25 °C.
7. Подсчитайте выросшие колонии.
8. При необходимости изолируйте отдельные колонии на картофельно-декстрозном агаре с 2% агара (M096F) и выполните видовую идентификацию.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M096F-500G
• Назначение изделия: агаризованная питательная среда
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительное сырьё
• Тип продукта: стандартный
• Конечный pH при 25 °C: 5,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,40–5,80
• Концентрация среды для определения реакции: 4,4 % масса/объём водного раствора при 25 °C
• Концентрация агара: 2,0 %
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 2,0% агара
• Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25 °C в течение 5–7 суток.

• Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон
• Требования к помещению: сухое, вентилируемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичностью. При недостаточно плотном закрытии или нарушении условий хранения возможно образование комков. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 2,0% агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

pH 4,4% масса/объём водного раствора при 25 °C: 5,6 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,40–5,80.

Культуральный контроль

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25 °C в течение 5–7 суток.

• Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соб