Питательная среда Основа кровяного агара с низким рН HiMedia M089-500G (уп/500 гр) — базовая сухая среда с конечным pH 6,8 ± 0,2. Применяется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов после добавления крови, при этом для использования без крови pH необходимо скорректировать до 7,2–7,4.

Назначение

Основа кровяного агара предназначена для приготовления кровяного агара путем добавления крови и последующего выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и Streptococci, из клинических образцов.

Среда также может использоваться без добавления крови как универсальная питательная среда. В этом случае pH следует довести до 7,2–7,4, поскольку большинство бактерий лучше растет в слабощелочной среде.

Технические характеристики

• Наименование: Основа кровяного агара с низким рН HiMedia M089-500G (уп/500 гр)
• Производитель: HiMedia
• Артикул: M089-500G
• Тип питательной среды: базовая
• Назначение изделия: основа для приготовления кровяного агара
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Упаковка: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности, HDPE)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH по контролю качества: 6,60–7,00
• Массовая концентрация при приготовлении: 40,00 г на 1000 мл воды
• Добавляемая кровь: 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови; для контроля качества также используется добавление 5–7 % об./об.
• Температура охлаждения перед добавлением крови: 45–50 °C
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин, давление около 0,103 МПа (15 фунтов на квадратный дюйм)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

— эквивалент настоя из бычьего сердца.

Принцип действия и интерпретация

Основа кровяного агара представляет собой высокопитательную базовую среду, к которой добавляют кровь для получения кровяного агара.

Настой HM B и триптоза обеспечивают среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Добавление крови повышает питательную ценность среды за счет дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Низкий pH среды — 6,8 — стабилизирует эритроциты и способствует формированию четкой зоны гемолиза. Такой pH также благоприятен для культивирования Streptococci и Pneumococci.

Кровяной агар с добавлением фенолфталеинфосфата может использоваться для выявления стафилококков, продуцирующих фосфат. Добавление соли и агара позволяет оценивать поверхностное загрязнение оборудования и свиных туш, а также определять диапазон солености, поддерживающий рост морских Flavobacteria. Среда может применяться для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Гемолитические реакции зависят от вида использованной животной крови:

• овечья кровь дает наилучшие результаты при выявлении стрептококков группы A;
• овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов;
• при использовании лошадиной крови колонии H. haemolyticus продуцируют гемолиз и могут имитировать Streptococcus pyogenes.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 40,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин; давление составляет около 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте приготовленную среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Типы образцов

• Кал
• Гной
• Мокрота

Для клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными рекомендациями.

После использования загрязненные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до желтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнево-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч в среде с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.