HiMedia M089-100G Основа кровяного агара с низким pH

Сухая питательная среда HiMedia M089-100G «Основа кровяного агара с низким pH» для изоляции и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов. Применяется в качестве базы для приготовления кровяного агара с добавлением крови для выделения Neisseria, Streptococci и других микроорганизмов из клинических образцов.

Принцип измерения и интерпретация

Основа кровяного агара представляет собой высокопитательную среду, используемую как база для приготовления полноценного кровяного агара путем добавления крови. Среда также может применяться как универсальная питательная среда без добавления крови (в этом случае pH следует довести до 7,2–7,4, так как большинство бактерий лучше растут в слабощелочной среде).

Низкое значение pH (6,8) данной основы стабилизирует эритроциты и способствует формированию четких зон гемолиза. Такой уровень pH особенно благоприятен для культивирования Streptococci и Pneumococci.

Функции компонентов:

• Инфузия HM B и триптоза: обеспечивают углеродом, азотом, аминокислотами и витаминами.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Кровь: обогащает среду факторами роста, необходимыми для требовательных организмов, и позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Особенности выбора крови:

• Кровь овец: обеспечивает наилучшие результаты для Streptococci группы A, однако не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus из-за дефицита пиридин-нуклеотидов.
• Кровь лошадей: поддерживает рост H. haemolyticus, колонии которого вызывают гемолиз и могут имитировать Streptococcus pyogenes.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Фекалии;
• Гной;
• Мокрота.

Специальные модификации:

• С добавлением фосфата фенолфталеина: для обнаружения фосфат-продуцирующих стафилококков.
• С добавлением соли и агара: для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней.
• Для определения диапазона солености морских Flavobacteria.
• Для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Методика приготовления и использования

1. Приготовление: суспендировать 40,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Растворение: нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизация: автоклавировать при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Добавление крови: охладить среду до 45–50 °C и асептически добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
5. Разлив: тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2.

Физико-химические свойства

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5–7 % стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишнево-красного цвета.
• Реакция 4,0 % водного раствора (при 25 °C): pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавление крови овец.
• Среда с кровью овец не поддерживает рост H. haemolyticus.
• Добавление крови лошадей или кроликов поддерживает рост H. haemolyticus, однако колонии напоминают бета-гемолитические Streptococci, что требует подтверждения.
• Характер гемолиза зависит от источника используемой крови.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Только для профессионального использования в In Vitro диагностике.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.