HiMedia M089-100G Основа кровяного агара с низким pH

Питательная среда HiMedia M089-100G Основа кровяного агара с низким pH — порошкообразная основа для приготовления кровяного агара с конечным pH 6,8 ± 0,2. Применяется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и Streptococci, из клинических образцов; для выявления гемолиза рекомендуется добавление овечьей крови.

Назначение

Основа кровяного агара предназначена для приготовления кровяного агара с добавлением дефибринированной крови. Среда используется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria, Streptococci и Pneumococci, из клинического материала.

Среда также может применяться без добавления крови как универсальная питательная среда. В этом случае pH следует довести до 7,2–7,4, поскольку большинство бактерий лучше растёт в слабощелочной среде.

Технические характеристики

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

¹ Эквивалент настоя из говяжьего сердца.

Принцип действия и интерпретация

Основа кровяного агара представляет собой высокопитательную базовую среду, которую обычно используют для приготовления кровяного агара путём добавления крови.

Низкий pH среды — 6,8 — стабилизирует эритроциты и способствует формированию прозрачной зоны гемолиза. Такое значение pH также благоприятно для культивирования Streptococci и Pneumococci.

Среда может применяться:

• с добавлением фенолфталеинфосфата — для выявления стафилококков, продуцирующих фосфатазу;
• с добавлением соли и агара — для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней;
• для определения диапазона солёности, поддерживающего рост морских Flavobacteria;
• для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Настой HM B и триптоза обеспечивают среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Гемолитические реакции зависят от вида используемой крови:

• овечья кровь даёт наилучшие результаты при работе с Streptococci группы A;
• овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов;
• при использовании лошадиной крови колонии H. haemolyticus образуют гемолиз и могут имитировать Streptococcus pyogenes.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

Клинический материал:

• фекалии;
• гной;
• мокрота.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами следует применять надлежащие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к базовой среде поддерживает рост H. haemolyticus, однако образующиеся колонии могут напоминать β-гемолитические Streptococci и требуют подтверждения.
3. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.
4. Для подтверждения необходимо проводить дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия тщательно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Эффективность продукта обеспечивается при использовании в течение указанного срока годности.

Ожидаемые характеристики

Характеристики среды соответствуют требованиям при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.