HiMedia M081-2.5KG Агар МакКонки с 0.15% желчных солей и кристаллическим фиолетовым

Питательная микробиологическая среда HiMedia M081-2.5KG Агар МакКонки с 0.15% желчных солей и кристаллическим фиолетовым — порошкообразный агар массой 2,5 кг, предназначенный для приготовления селективной дифференциальной среды. Среда применяется для выделения и дифференциации колиформных организмов и других кишечных патогенов из клинических, пищевых, молочных и водных образцов; хранение — при 10–30 °C.

Назначение и область применения

Среда предназначена для селективного выделения и дифференциации колиформных организмов и других кишечных патогенов из клинических и неклинических образцов.

Агар МакКонки — слабоселективная дифференциальная питательная среда для обнаружения и выделения грамотрицательных микроорганизмов из:

• клинических образцов;
• молочных продуктов;
• пищевых продуктов;
• проб воды;
• фармацевтических образцов;
• промышленных образцов.

Среда также рекомендуется для выделения и восстановления представителей семейства Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек. Фармакопея США рекомендует среду для проведения испытаний на микробиологические пределы.

Среда M081, соответствующая составу, рекомендованному Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA), применяется:

• для прямого посева проб воды на колиформные палочки;
• для исследования пищевых образцов на микроорганизмы, вызывающие пищевые отравления;
• для выделения видов Salmonella и Shigella из сыра;
• для подсчёта коли-аэрогенезных бактерий в фекалиях крупного рогатого скота и овец;
• для подсчёта коли-аэрогенезных бактерий и нелактозосбраживающих микроорганизмов на тушках птицы;
• для подсчёта бактерий в облучённом консервированном фарше из курицы;
• для выявления коли-аэрогенезных бактерий при исследовании рода Aeromonas.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии, моча и другие материалы.
• Пищевые продукты и молочные образцы.
• Пробы воды.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована с учётом параметров эффективности среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 51,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения при осторожном перемешивании до полного растворения агара.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
7. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Принцип действия и интерпретация

Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, которые подавляют рост большинства грамположительных бактерий. Концентрация желчных солей ниже, чем в других средах для посева кишечных микроорганизмов, поэтому среда является слабоселективной.

Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу:

• лактозосбраживающие штаммы образуют красные или розовые колонии, иногда окружённые зоной осаждённых кислотой желчных солей;
• красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8;
• нелактозосбраживающие штаммы, такие как Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Пептон, триптон и желатиновый пептон являются источниками азота, углерода, аминокислот с длинной цепью и других питательных веществ. Лактоза служит сбраживаемым углеводом. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Желчные соли и кристаллический фиолетовый являются селективными агентами, подавляющими рост грамположительных организмов. Нейтральный красный используется как индикатор pH.

По сравнению с другими средами для посева кишечных микроорганизмов M081 содержит пониженную концентрацию желчных солей, а дифференциация лактозосбраживающих и нелактозосбраживающих бактерий основана на изменении окраски колоний и среды.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с фиолетовым оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,15 % при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления для роста бактерий на агаре с переваром казеина соевых бобов принят за 100 %.