HiMedia M081-10KG Агар МакКонки с 0.15% желчных солей и кристаллическим фиолетовым

Питательная агаризованная среда HiMedia M081-10KG «Агар МакКонки с 0,15 % желчных солей и кристаллическим фиолетовым» производства HiMedia предназначена для селективного выделения и дифференциации колиформных микроорганизмов и других кишечных патогенов. Среда применяется для клинических и не клинических образцов, поставляется в виде порошка массой 10 кг и требует приготовления с последующей стерилизацией автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин.

Назначение и область применения

Среда предназначена для селективного выделения и дифференциации колиформных микроорганизмов и других кишечных патогенов из клинических и не клинических образцов.

Применяется для:

• обнаружения и выделения грамотрицательных микроорганизмов;
• выделения и восстановления представителей семейства Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек;
• прямого посева проб воды для выявления колиформных палочек;
• исследования пищевых образцов на микроорганизмы, вызывающие пищевые отравления;
• выделения видов Salmonella и Shigella из сыра;
• подсчёта коли-аэрогенезных бактерий в фекалиях крупного рогатого скота и овец;
• подсчёта коли-аэрогенезных бактерий и нелактозосбраживающих микроорганизмов на тушках птицы;
• подсчёта бактерий в облучённом консервированном мясном фарше из курятины;
• выявления коли-аэрогенезных бактерий при исследованиях рода Aeromonas;
• выполнения испытаний на микробиологические пределы в соответствии с рекомендациями USP.

Типы образцов:

• клинические образцы: фекалии, моча и другие;
• пищевые продукты;
• молочные образцы;
• пробы воды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар МакКонки представляет собой слабоселективную и дифференциальную питательную среду, преимущественно используемую для обнаружения и выделения грамотрицательных микроорганизмов из клинических образцов, молочных продуктов, пищевых продуктов, воды, фармацевтических и промышленных материалов.

Селективность среды обусловлена низкой концентрацией желчных солей по сравнению с другими средами для выделения кишечных микроорганизмов. Желчные соли и кристаллический фиолетовый подавляют рост большинства грамположительных бактерий, тогда как грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде.

Дифференциация основана на способности микроорганизмов сбраживать лактозу:

• лактозосбраживающие штаммы формируют красные или розовые колонии, иногда окружённые зоной осаждённых кислотой желчных солей;
• красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8;
• нелактозосбраживающие штаммы, включая Shigella и Salmonella, формируют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Функции компонентов:

• пептон, триптон и желатиновый пептон служат источниками азота, углерода, аминокислот с длинной цепью и других питательных веществ;
• лактоза является сбраживаемым углеводом;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• желчные соли и кристаллический фиолетовый являются селективными агентами, подавляющими рост грамположительных микроорганизмов;
• нейтральный красный — индикаторный краситель pH.

Среда M081 соответствует среде, рекомендованной APHA, и может использоваться для прямого посева проб воды на колиформные палочки, исследования пищевых образцов и выделения Salmonella и Shigella из сыра.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 51,53 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения, осторожно перемешивая, чтобы полностью растворить агар.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
8. Перед инокуляцией поверхность затвердевшей среды должна быть сухой.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агаризованная питательная среда
• Масса: 10 кг
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Концентрация для контроля реакции: 5,15 % масс./об. водного раствора при 25 °C
• Среда после приготовления: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с фиолетовым оттенком
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем
• Внешний вид сухой среды: от светло-жёлтого до розового однородного сыпучего порошка

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с фиолетовым оттенком.

Реакция

Реакция 5,15 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принята за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновой агаризованной среде.