HiMedia M081-100G Агар МакКонки с 0.15% желчных солей и кристаллическим фиолетовым

Агар МакКонки HiMedia M081-100G с 0,15 % желчных солей и кристаллическим фиолетовым — сухая питательная среда для селективного выделения и дифференциации колиформных микроорганизмов и других кишечных патогенов. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов, при этом выделенные микроорганизмы требуют дополнительного биохимического и серологического подтверждения.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и дифференциации колиформных микроорганизмов и других кишечных патогенов из клинических и неклинических образцов.

Основные типы образцов:

• клинический материал: фекалии, моча и другие образцы;
• пищевые продукты и молочные образцы;
• пробы воды.

Состав

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар МакКонки относится к слабоселективным и дифференциальным плотным питательным средам, преимущественно используемым для обнаружения и выделения грамотрицательных микроорганизмов из клинических образцов, молочных продуктов, пищевых продуктов, воды, фармацевтических и промышленных материалов.

Среда также рекомендована для выделения и восстановления представителей семейства Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек. Фармакопея США (USP) рекомендует применение такой среды при выполнении испытаний на микробиологические пределы.

Селективность среды обусловлена относительно низкой концентрацией желчных солей, которые подавляют рост грамположительных микроорганизмов, но применяются в меньшей концентрации по сравнению с другими средами для выделения кишечных бактерий.

Среда M081 соответствует среде, рекомендованной Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA), и может использоваться:

• для непосредственного посева проб воды на колиформные палочки;
• при исследовании пищевых образцов на микроорганизмы, вызывающие пищевые отравления;
• для выделения видов Salmonella и Shigella из сыра;
• для подсчёта бактерий группы коли-аэрогенес в фекалиях крупного рогатого скота и овец;
• для подсчёта бактерий группы коли-аэрогенес и нелактозосбраживающих микроорганизмов на тушках птицы;
• для подсчёта бактерий в облучённом консервированном фарше из курятины;
• для выявления бактерий группы коли-аэрогенес при исследовании рода Aeromonas.

Агар МакКонки является одной из первых селективных и дифференциальных сред для культивирования кишечных микроорганизмов из различных клинических образцов.

Исходная формула среды содержит белковые компоненты, желчные соли, хлорид натрия и два красителя. Селективное действие обеспечивается кристаллическим фиолетовым и желчными солями, ингибирующими большинство видов грамположительных бактерий. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу.

Штаммы, ферментирующие лактозу, формируют красные или розовые колонии; вокруг колоний может образовываться зона осаждённых кислотой желчных солей. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, формируют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Функции компонентов:

• пептон, триптон и желатиновый пептон являются источниками азота, углерода, аминокислот с длинной цепью и других питательных веществ;
• лактоза — сбраживаемый углевод;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• желчные соли и кристаллический фиолетовый — селективные агенты, подавляющие рост грамположительных микроорганизмов;
• нейтральный красный — индикатор pH.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 51,53 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения при осторожном перемешивании до полного растворения агара.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Ориентировочное давление — около 0,103 МПа.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
8. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с клиническими образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Несмотря на рекомендацию среды для селективного выделения микроорганизмов, для окончательного подтверждения необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические исследования.
2. Поверхность среды должна быть сухой в момент инокуляции.
3. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные характеры роста на среде.
4. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При работе с конкретными микроорганизмами, не указанными в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с пурпурным оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,15 % при 25 °C:

• pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления для роста бактерий на агаре с соево-казеиновым переваром принята за 100 %.