HiMedia M078A-500G Модифицированный железный агар Клиглера

Сухая питательная среда HiMedia M078A-500G Модифицированный железный агар Клиглера для идентификации Yersinia enterocolitica. Применяется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основе ферментации декстрозы, лактозы и продукции сероводорода (H₂S).

Принцип измерения и интерпретация

Модифицированный железный агар Клиглера представляет собой комбинацию сред Клиглера и двухсахарного агара Рассела. Среда используется для дифференциации брюшного тифа, дизентерии и родственных бацилл, а также для идентификации Yersinia enterocolitica согласно рекомендациям комитета ISO.

Механизм дифференциации основан на следующем:

• Ферментация декстрозы: приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Из-за малого количества декстрозы производство кислоты ограничено, что вызывает реокисление индикатора на поверхности среды (скос остаётся красным).
• Ферментация лактозы: приводит к образованию большого количества кислоты, что препятствует реокислению, и вся среда (включая скос) становится жёлтой.
• Продукция сероводорода (H₂S): сочетание сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания всего столбика или в виде кольца у верхней части столбика.
• Реакция неферментаторов лактозы (например, Salmonella и Shigella): изначально формируют жёлтый скос за счёт ферментации глюкозы. После исчерпания запаса глюкозы в аэробной среде скоса происходит окисление кислот, и реакция возвращается к щелочной (красный скос). В анаэробной среде столбика реверсии не происходит, поэтому он остаётся кислым (жёлтый столбик).
• Отсутствие ферментации: если не ферментируются ни глюкоза, ни лактоза, среда сохраняет исходный цвет.
• Газообразование: обнаруживается в виде отдельных пузырьков, растрескивания или смещения агара в столбике.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2 # Эквивалент мясного экстракта

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 57,41 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки в наклонном положении для формирования скоса с глубиной столбика около 25 мм (1 дюйм).

Примечание: Избегайте перегрева, так как это может привести к выпадению осадка в среде. Наилучшие результаты достигаются при использовании свежеприготовленной среды.

Посев и анализ

Для идентификации на агар Клиглера пересевают чистые культуры с других сред, таких как агар МакКонки (M081), бисмуфит-сульфитный агар (M027), дезоксихолат-цитратный агар (M065) или SS-агар (M108).

• Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю.
• Результаты следует оценивать через 18–24 часа; более поздний считывание может привести к ошибочным результатам.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета
• Желирование: плотное, сопоставимо с 1,5% агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Область применения и образцы

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами из следующих типов образцов:

• Клинические образцы (согласно установленным руководствам по обращению с биоматериалом).
• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции.
• Образцы воды (согласно местным стандартам и руководствам).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM. # Ранее известна как Enterobacter aerogenes.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте бутылку во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования (In Vitro диагностика).
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: все загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.