HiMedia M078-100G Железный агар Клиглера

Дифференциальная питательная среда HiMedia M078-100G Железный агар Клиглера для идентификации грамотрицательных энтеробактерий. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов на основе ферментации глюкозы (декстрозы), лактозы и продукции сероводорода (H₂S).

Принцип измерения и интерпретация

Железный агар Клиглера представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца и двухсахарного агара Рассела. Среда используется для дифференциации возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных бацилл.

Основные механизмы анализа:

• Ферментация сахаров: Ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Из-за малого количества декстрозы в аэробной среде (на скосе) происходит реокисление индикатора, и он остается красным. При ферментации лактозы вырабатывается большое количество кислоты, что предотвращает реокисление, и вся среда (включая скос) окрашивается в жёлтый цвет.
• Продукция сероводорода (H₂S): Комбинация сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить выделение H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания столбика или образования чёрного кольца у его верхней части.
• Газообразование: Обнаруживается в виде отдельных пузырьков, трещин или смещения агара в столбике среды.

Интерпретация результатов:

• Неферментаторы лактозы (например, Salmonella и Shigella): Сначала образуют жёлтый скос (за счет ферментации глюкозы), затем, по мере исчерпания глюкозы в аэробных условиях, реакция возвращается к щелочной (красный скос). В анаэробном столбике реакция остается кислой (жёлтый столбик).
• Ферментаторы лактозы: Образуют жёлтые скосы и жёлтые столбики.
• Отсутствие ферментации: Среда сохраняет исходный цвет (ни глюкоза, ни лактоза не ферментируются).

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скоса со столбиком глубиной около 25,4 мм (1 дюйм).

Примечание: Избегайте перегрева, чтобы предотвратить выпадение осадка в среде. Не используйте пробирки или бутыли с завинчивающимися крышками.

Процедура и требования к образцам

• Типы образцов: Изолированные микроорганизмы из клинических проб, проб пищевых продуктов, молочных продуктов и воды.
• Посев: Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю.
• Источник инокулята: Чистые культуры с таких сред, как агар МакКонки (M081), бисмит-сульфитный агар (M027), дезоксихолатно-цитратный агар (M065), SS-агар (M108) и др.
• Сбор проб: Для проб воды, пищевых и молочных продуктов, а также клинических образцов следует руководствоваться соответствующими местными стандартами и методическими рекомендациями.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Назначение: Дифференциальный агар
• Внешний вид: Гомогенный свободно текучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: Красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Желирование: Твёрдый гель (сопоставимо с 1,5 % агаром)
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Происхождение компонентов: Животное
• Тип продукта: Стандартный
• Физическая форма: Порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Ограничения и предостережения

1. Результаты следует фиксировать через 18–24 часа для предотвращения ошибочных выводов.
2. Для инокуляции необходимо использовать только прямую проволочную петлю.
3. Для получения достоверных результатов следует использовать чистые изоляты.
4. Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
5. Только для профессионального использования In Vitro.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте бутыль для предотвращения образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Загрязненные материалы и остатки среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.