Основа кровяного агара HiMedia M073-100G (100 г)

Основа кровяного агара HiMedia M073-100G (100 г) — порошковая питательная среда для приготовления кровяного агара с конечным pH 7,3 ± 0,2. Среда предназначена для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и стрептококки, но не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus при добавлении бараньей крови.

Назначение

Основа кровяного агара применяется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов из клинических и не клинических образцов после добавления крови. Среда также может использоваться без добавления крови как универсальная питательная среда.

Основные области применения:

• клинический материал: мазки из зева, вагинальные выделения и другой патологический материал;
• пищевые образцы;
• приготовление кровяного агара;
• приготовление антигенов Salmonella Typhi;
• выявление стафилококков, продуцирующих фосфат, при добавлении фенолфталеинфосфата;
• оценка поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней при добавлении соли и агара;
• определение диапазона солёности для морских флавобактерий.

Основа кровяного агара рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) и стандартными методами для анализа пищевых образцов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Пептон HM B эквивалентен пептону из говяжьего сердца.

Принцип действия и интерпретация

Пептон HM B и триптоза обеспечивают среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуализировать гемолитические реакции. Характер гемолиза зависит от вида использованной крови:

• баранья кровь обеспечивает наилучшие результаты при культивировании стрептококков группы A;
• баранья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов;
• при использовании лошадиной крови колонии H. haemolyticus образуют гемолиз и могут имитировать Streptococcus pyogenes.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов силы на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Мазки из зева.
• Вагинальные выделения.
• Другой патологический клинический материал.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять баранью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако формирующиеся колонии могут напоминать β-гемолитические стрептококки и требуют подтверждения дополнительными тестами.
3. Картина гемолиза изменяется в зависимости от источника использованной крови.
4. Для подтверждения результатов необходимо проводить дополнительные тесты.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности могут содержаться в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция и pH

Реакция: водный раствор концентрацией 4,0 % масс./об. при 25 °C.

Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч на среде с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.