Основа бульона для микобактерий HiMedia M067-500G (уп/500 гр)

Основа бульона для микобактерий HiMedia M067-500G (уп/500 гр) производства HiMedia представляет собой базовую сухую среду для приготовления жидкого питательного бульона. Применяется для быстрого выращивания чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов; имеет сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения и интерпретация

Бульон Дюбо (Dubos Broth) разработан как модификация сред, созданных Дюбо и Дэвисом, а также Дюбо и Миддлбруком.

В состав среды входят триптон и L-аспарагин, которые служат источниками азота. Полисорбат 80 (эфир олеиновой кислоты) выполняет роль сурфактанта, обеспечивая необходимые жирные кислоты для репликации микобактерий и стимулируя рост за счет диспергирования бактерий. Фосфаты в сочетании с хлоридом кальция служат буферными агентами и источниками фосфатов. Сульфаты магния, цинка, меди и цитрат аммония железа обеспечивают микроэлементами.

Добавление бычьего альбумина позволяет связывать свободные жирные кислоты, которые могут быть токсичны для микобактерий. Альбумин подвергается термической обработке для инактивации липазы, которая в противном случае могла бы высвобождать жирные кислоты из полисорбата 80.

При использовании сыворотки в качестве добавки рост обычно инициируется при меньших посевных дозах и протекает более обильно, чем при использовании альбумина V; при этом характер роста с сывороткой более гранулярный, а с альбумином — диффузный.

Методика приготовления и стерилизации

1. Суспендируйте 1,3 г порошка в 180 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте смесь до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте к каждому объему 180 мл базового бульона один из следующих компонентов:
   • 20 мл стерильного бычьего альбумина V;
   • 20 мл стерильной сыворотки;
   • одну ампулу стерильной добавки альбумин-глюкоза (Albumin Glucose Supplement, арт. FD201).

Область применения

Среда предназначена для работы с клиническими образцами (мокрота).

Меры предосторожности:

• Работа с культурами микобактерий требует максимальной осторожности, так как они высокоинфекционны.
• Использовать только в лабораторных условиях (In Vitro) профессиональным персоналом.
• После использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: регулярный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: светло-желтый или бежевый гомогенный свободнотекущий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка
• Диапазон pH: 6,40–6,80

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики роста наблюдаются при добавлении добавки альбумин-глюкоза (FD201), стерильного бычьего альбумина V или стерильной сыворотки после инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель в атмосфере с 5–10 % CO₂.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Ограничения: протеолитические контаминанты могут вызвать локальный или полный гидролиз среды. Каждая партия протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA).