Основа бульона для микобактерий HiMedia M067-500G (уп/500 гр)

Компонент питательной среды «Основа бульона для микобактерий HiMedia M067-500G (уп/500 гр)» для приготовления жидкой среды и быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов. Основа применяется в микробиологических лабораториях для выращивания микобактерий; готовая среда имеет pH 6,6 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение

Основа бульона по Дюбо предназначена для приготовления жидкой питательной среды для быстрого выращивания чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 1,3 г основы в 180 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте на каждые 180 мл основы бульона один из вариантов обогащения:
   • 20 мл стерильного бычьего альбумина V;
   • 20 мл стерильной сыворотки;
   • содержимое одного флакона стерильной добавки «альбумин — глюкоза» FD201.

Принцип действия и интерпретация

Туберкулёз вызывается Mycobacterium tuberculosis и передаётся с аэрозольными частицами, образующимися при кашле больных лёгочным туберкулёзом. Инфицирование происходит при вдыхании восприимчивым человеком аэрозольных частиц, содержащих бактерии.

Бульон Дюбо сформулирован на основе состава, описанного Дюбо и соавторами, и является модификацией среды, первоначально разработанной Дюбо и Дэвисом, а также Дюбо и Миддлбруком.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• триптон и L-аспарагин являются источниками азота;
• полисорбат 80, представляющий собой эфир олеиновой кислоты, действует как поверхностно-активное вещество, поставляет необходимые жирные кислоты для репликации микобактерий и усиливает рост за счёт диспергирования бацилл;
• фосфаты совместно с хлоридом кальция буферируют среду и служат источниками фосфатов;
• сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммония железа поставляют микроэлементы и сульфаты;
• бычий альбумин связывает свободные жирные кислоты, которые могут быть токсичными для микобактерий;
• альбумин подвергают термической обработке для инактивации липазы, способной высвобождать жирные кислоты из полисорбата 80, входящего в состав среды.

Бульон Дюбо, обогащённый сывороткой, обычно инициирует рост из меньшего количества посевного материала и обеспечивает более обильный рост, чем базовая среда, обогащённая альбумином V. При обогащении сывороткой рост обычно имеет более гранулярный характер, а при обогащении альбумином — более диффузный.

При работе с культурами микобактерий необходимо соблюдать максимальную осторожность, поскольку микобактерии высокоинфекционны.

Тип образца

• Клинический образец: мокрота.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Каждая серия среды прошла испытания на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости применения среды для микроорганизмов, не указанных в COA, пользователь должен валидировать среду с учётом конкретных требований.
2. Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или бежевый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 0,65 % при добавлении 1 % глицерина и температуре 25 °C.

• pH: 6,6 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления добавки «альбумин — глюкоза» FD201, стерильного бычьего альбумина V или стерильной сыворотки и инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: базовая
• Назначение изделия: основа
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Хранение и срок годности

• Температура хранения основы: ниже 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.