HiMedia M067-100G Основа бульона Дюбо

Сухая основа бульона Дюбо HiMedia M067-100G предназначена для быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов. Используется для выделения возбудителей туберкулеза из клинических образцов (мокроты); вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Бульон Дюбо разработан как модификация сред, созданных Дюбо и Дэвисом, а также Дюбо и Миддлбруком. В качестве источников азота используются триптон и L-аспарагин. Полисорбат 80 (эфир олеиновой кислоты) выполняет роль сурфактанта, обеспечивая необходимые жирные кислоты для репликации микобактерий и стимулируя рост за счет диспергирования бацилл. Фосфаты в сочетании с хлоридом кальция служат буферной системой и источником фосфатов. Сульфаты магния, цинка, меди и цитрат аммония железа(III) обеспечивают содержание микроэлементов. Бычий альбумин связывает свободные жирные кислоты, которые могут быть токсичны для микобактерий; альбумин подвергается термической обработке для инактивации липазы, способной высвобождать жирные кислоты из полисорбата 80.

При обогащении среды сывороткой рост обычно инициируется при меньших посевных дозах и протекает более обильно, чем при использовании альбумина V. Характер роста при добавлении сыворотки более гранулярный, при добавлении альбумина — более диффузный.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 1,3 г порошка в 180 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте к каждому объему 180 мл основы бульона 20 мл стерильного бычьего альбумина V, стерильной сыворотки или одну виалу стерильной добавки «Альбумин-Глюкоза» (FD201).

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до бежевого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция (pH 0,65% водного раствора с 1% глицерином при 25 °C): 6,6 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении добавки «Альбумин-Глюкоза» (FD201), стерильного бычьего альбумина V или стерильной сыворотки после инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель в атмосфере с 5–10 % CO₂.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа клинических образцов (мокроты). Предназначено только для диагностики in vitro и профессионального использования.

Ограничения:

• Каждая партия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.
• Протеолитические контаминанты могут вызвать локальный или полный распад среды.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе с культурами микобактерий следует соблюдать максимальную осторожность, так как они высокоинфекционны. Использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.

Все загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.