HiMedia M067-100G Основа бульона Дюбо

Порошковая питательная среда HiMedia M067-100G Основа бульона Дюбо предназначена для приготовления жидкой среды и имеет массу 100 г. Применяется для быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов; pH приготовленной среды составляет 6,6 ± 0,2.

Назначение

Основа бульона Дюбо предназначена для приготовления жидкой питательной среды для быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов.

Тип образца: клинические образцы, мокрота.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 1,3 г основы в 180 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление составляет приблизительно 0,103 МПа (15 фунтов на кв. дюйм).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте на каждые 180 мл основы бульона один из компонентов:
   • 20 мл стерильного бычьего альбумина V;
   • стерильную сыворотку;
   • один флакон стерильной добавки «Альбумин — глюкоза» FD201.

Принцип действия и интерпретация

Туберкулёз вызывается Mycobacterium tuberculosis, который передаётся с содержащими бактерии аэрозольными частицами, образующимися при кашле пациентов с лёгочным туберкулёзом. Заражение происходит при вдыхании восприимчивым человеком аэрозольных частиц с бактериями.

Бульон Дюбо сформулирован в соответствии с разработками Дюбо и соавторов и представляет собой модификацию среды, первоначально разработанной Дюбо и Дэвисом, а также Дюбо и Миддлбруком.

• Триптон и L-аспарагин служат источниками азота.
• Полисорбат 80, являющийся эфиром олеиновой кислоты, выполняет функцию поверхностно-активного вещества. Компонент обеспечивает микобактерии необходимыми жирными кислотами и способствует увеличению роста за счёт диспергирования бацилл.
• Фосфаты совместно с хлоридом кальция буферируют среду и служат источниками фосфатов.
• Сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммония и железа обеспечивают среду микроэлементами и сульфатами.
• Бычий альбумин связывает свободные жирные кислоты, которые могут быть токсичными для микобактерий.
• Альбумин подвергается термической обработке для инактивации липазы, которая может высвобождать жирные кислоты из полисорбата 80, входящего в состав среды.

Основа бульона Дюбо, обогащённая сывороткой, обычно инициирует рост из меньшего инокулюма и обеспечивает более обильный рост по сравнению с базовой средой, обогащённой альбумином V. При обогащении сывороткой рост обычно имеет более выраженный гранулярный характер, а при обогащении альбумином — более диффузный.

При работе с культурами микобактерий необходимо соблюдать максимальную осторожность, поскольку микобактерии высококонтагиозны.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Указания по безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Каждая партия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется выполнить валидацию с учётом индивидуальных требований пользователя.
2. Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное разжижение среды.

Ожидаемые характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до бежевого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция

Реакция 0,65 % (м/об) водного раствора с 1 % глицерина при 25 °C: pH 6,6 ± 0,2.

pH

6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %, после добавления добавки «Альбумин — глюкоза» FD201, стерильного бычьего альбумина V или стерильной сыворотки.

Технические характеристики

| Параметр | Значение | | --- |