Дезоксихолат-лактозный агар HiMedia M066-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная селективная питательная среда Дезоксихолат-лактозный агар HiMedia M066-500G (уп/500 г) для выделения и подсчета колиформных бактерий. Применяется для анализа проб воды, сточных вод, молока и молочных продуктов; содержит дезоксихолат натрия для подавления роста грамположительных микроорганизмов.

Принцип измерения и интерпретация

Дезоксихолат-лактозный агар является модификацией агара с дезоксихолатом по Лейфсону и приготовлен в соответствии с формулами, указанными в стандартах анализа молочных продуктов, воды, сточных вод и пищевых продуктов. Отличием от стандартного агара с дезоксихолатом (GM030) является сниженная концентрация дезоксихолата натрия.

Среда селективна в отношении грамположительных организмов, рост которых подавляется оптимальной концентрацией дезоксихолата натрия и цитрата натрия. Среда позволяет дифференцировать кишечные бациллы, ферментирующие и не ферментирующие лактозу:

• Лактозоположительные бактерии: образуют красные/розовые колонии. Расщепление лактозы приводит к закислению среды вокруг колоний, из-за чего индикатор нейтральный красный меняет цвет на красный. Такие колонии обычно окружены зоной помутнения (осадка дезоксихолевой кислоты), возникающей вследствие закисления.
• Лактозоотрицательные бактерии: образуют бесцветные колонии.

Специальный пептон обеспечивает азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие необходимые питательные вещества.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте и нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Если среда используется сразу, автоклавирование не требуется.
4. Для хранения среду необходимо стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут. Избегайте перегрева.
5. Охладите до 45–50 °C, перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

• Для подсчета используется метод посева в глубокий слой агара (pour plate method) с использованием соответствующих разведений.
• Для облегчения подсчета колоний поверх застывшего агара можно залить тонкий дополнительный слой среды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,1 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-оранжевый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 4,25% водного раствора при 25 °C составляет 7,1 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,90–7,30).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

Типы образцов

• Пробы молочных продуктов.
• Пробы воды.

Ограничения метода

1. Некоторые виды Salmonella не ферментируют лактозу и не продуцируют H₂S.
2. Среда является селективной; для подтверждения результатов необходимо параллельное использование других сред.
3. Для окончательного подтверждения следует провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности. Используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными регламентами.