Сухая селективно-дифференциальная питательная среда HiMedia M066-100G Дезоксихолат-лактозный агар (Хайнс) предназначена для выделения и количественного определения колиформных бактерий. Дезоксихолат-лактозный агар применяется для анализа воды, сточных вод, молока и молочных продуктов; готовая среда имеет pH 7,1 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для выделения и количественного определения колиформных бактерий в следующих типах образцов:

• молочные образцы;
• образцы воды;
• сточные воды.

Для количественного определения применяют метод заливных чашек с использованием подходящих разведений. Для облегчения подсчёта колоний поверх затвердевшей среды, залитой методом заливных чашек, можно нанести дополнительный тонкий слой агара.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат-лактозный агар представляет собой модификацию дезоксихолатного агара по Лейфсону. Формула среды подготовлена в соответствии с методиками, указанными для выявления колиформных бацилл при исследовании молочных продуктов, воды, сточных вод и пищевых продуктов.

Среда отличается от дезоксихолатного агара GM030 сниженной концентрацией дезоксихолата натрия.

Механизм действия компонентов:

• дезоксихолат натрия и цитрат натрия в оптимальной концентрации подавляют рост грамположительных микроорганизмов, обеспечивая селективность среды;
• лактоза используется для дифференциации энтеробактерий по способности ферментировать лактозу;
• пептон специальный служит источником азотсодержащих и углеродсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью и других необходимых питательных веществ;
• при ферментации лактозы образуется кислота, подкисляющая среду вокруг соответствующих колоний;
• нейтральный красный изменяет цвет в кислой среде, поэтому бактерии, ферментирующие лактозу, обычно образуют красные или розовые колонии;
• бактерии, не ферментирующие лактозу, образуют бесцветные колонии;
• колиформные бактерии при наличии формируют на среде розовые колонии;
• вокруг таких колоний обычно образуется мутная зона осаждённой дезоксихолевой кислоты вследствие подкисления среды;
• в кислой среде дезоксихолат натрия соединяется с нейтральным красным, в результате чего краситель выходит из раствора, сопровождаясь осаждением дезоксихолата.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте.
3. Нагрейте до кипения и полностью растворите среду.
4. Если среда будет использована сразу, автоклавирование не требуется.
5. Если среда будет храниться, стерилизуйте её автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Не допускайте перегрева.
7. Охладите среду до 45–50 °C.
8. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Наименование: дезоксихолат-лактозный агар
• Артикул: M066-100G
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок светло-жёлтого или розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,25 % масс./об. при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее вид назывался Enterobacter aerogenes.

** Ранее название — Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Ограничения применения

1. Некоторые виды Salmonella не ферментируют лактозу, а некоторые виды не образуют H₂S.
2. Среда является селективной, поэтому для подтверждения результатов её необходимо использовать параллельно с другими питательными средами.
3. Для подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Условия хранения и срок годности

Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость.

Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.

Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Утилизируйте инфекционные материалы в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать согласно действующим методикам лабораторной работы.