Питательная среда «Цитратный агар с дезоксихолатом натрия HiMedia M065B (уп/500 гр)» — порошковый агар для селективного выделения кишечных патогенов. Цитратный агар с дезоксихолатом натрия применяется для микробиологического контроля фармацевтических образцов и пищевых продуктов, при этом дезоксихолат и цитрат подавляют рост грамположительных бактерий и большинства нормальных кишечных микроорганизмов.

Назначение

Цитратный агар с дезоксихолатом натрия HiMedia M065B рекомендован для селективного выделения кишечных патогенов в соответствии с Британской фармакопеей (BP). Среда предназначена для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических образцов.

Изделие: агар.
Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Состав среды на 1 л:

— мясной пептон.

— говяжий экстракт.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных показателей эффективности.

Значение pH после нагревания: 7,3 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Среда Deoxycholate Citrate Agar приготовлена по модифицированной формуле Лейфсона и также рекомендована Британской фармакопеей; в документе среда обозначена как Agar medium J.

Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 подавляет рост грамположительных бактерий. Proteus и другие грамположительные организмы также подавляются благодаря повышенной концентрации цитрата и солей дезоксихолата. Восстановление цитрата железа до сульфида железа под действием H₂S вызывает характерное появление колоний с чёрным центром.

Цитратная соль в концентрации, предусмотренной рецептурой, подавляет рост грамположительных бактерий и большинства других нормальных кишечных микроорганизмов. Сочетание пептона HM и пептона HM B обеспечивает поступление азота, минеральных веществ и витаминных факторов, необходимых для усиленного роста. Лактозы моногидрат служит источником сбраживаемого углевода.

Нейтральный красный используется как индикатор: лактозосбраживающие микроорганизмы, включая колиформные бактерии, формируют розовые колонии, а несбраживающие лактозу микроорганизмы — бесцветные колонии. Salmonella образует хорошо развитые бесцветные колонии. Кислота, вырабатываемая лактозосбраживающими микроорганизмами, может вызывать осаждение дезоксихолата и появление зоны осадка вокруг колонии.

Среда обеспечивает необходимые факторы роста для ряда ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Селективность среды допускает внесение достаточно большого инокулюма без риска перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

При необходимости выделения Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую питательную среду.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 69,02 г обезвоженного порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Избегайте чрезмерного нагревания, поскольку он ухудшает свойства среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

Из-за различий в питательных потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовато-бежевый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

pH

pH: 7,10–7,50.

Испытание стимуляции роста

Испытание стимуляции роста проводят в соответствии с Британской фармакопеей (BP).

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принята равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде; бутылку необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие свойства продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный контекст

В отличие от менее селективных питательных сред, цитратный агар с дез