HiMedia M065B-500G Дезоксихолат-цитратный агар (агаровая среда)

Сухая питательная среда HiMedia M065B-500G Дезоксихолат-цитратный агар для селективного выделения кишечных патогенов в соответствии с Британской фармакопеей (BP). Применяется для изоляции и максимального восстановления бактерий групп Salmonella и Shigella из пищевых и фармацевтических продуктов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Дезоксихолат-цитратный агар приготовлена по модифицированной формуле Лейфсона и соответствует требованиям Британской фармакопеи (обозначается как агаровая среда J).

Механизм селективности и индикации:

• Подавление микрофлоры: дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 подавляет рост грамположительных бактерий. Высокая концентрация цитрата и дезоксихолата натрия также ингибирует рост Proteus и других грамположительных микроорганизмов.
• Индикация: нейтральный красный служит индикатором. Бактерии, ферментирующие лактозу (например, колиформы), образуют розовые колонии. Неферментирующие лактозу микроорганизмы образуют бесцветные колонии.
• Специфика Salmonella: образуют хорошо развитые бесцветные колонии. Восстановление цитрата железа (III) до сульфида железа при наличии H₂S придает колониям характерный черный центр.
• Питательная база: комбинация пептонов HM и HM peptone B обеспечивает азот, минералы и витамины, необходимые для роста ауксотрофных штаммов Paratyphi и Typhi. Лактоза моногидрат выступает в качестве ферментируемого углевода.

Высокая селективность среды позволяет использовать достаточно плотные посевы без риска подавления Shigella и Salmonella сопутствующей микрофлорой.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 69,02 г сухого порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. ВНИМАНИЕ: Не автоклавировать. Избегайте чрезмерного перегрева, так как это вредит свойствам среды.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте перед розливом в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• pH после нагрева: 7,3 ± 0,2
• pH готового геля: 7,10–7,50

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до розовато-бежевого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,35% агаром.
• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красно-оранжевого цвета.
• Тест на стимулирование роста: проводится в соответствии с BP.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 часов. Скорость восстановления считается 100 % для роста бактерий на агаре с соевым казеином (Soyabean Casein Digest Agar).

Область применения и работа с образцами

• Тип образцов: фармацевтические пробы.
• Сбор и обработка: при работе с фармацевтическими образцами следует использовать методы обработки согласно установленным руководствам.
• Ограничения: из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте бутылку во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Безопасность: использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.