Питательная агаровая среда HiMedia M065B-500G Дезоксихолат-цитратный агар (агаровая среда) предназначена для селективного выделения кишечных патогенов. Применяется для анализа фармацевтических образцов и пищевых продуктов, при этом для выделения Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую среду.

Назначение

Дезоксихолат-цитратный агар предназначен для селективного выделения энтеропатогенов в соответствии с Британской фармакопеей (BP). Среда используется для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Мясной пептон

Говяжий экстракт

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолат-цитратный агар приготовлен по модифицированной формуле Лейфсона и также рекомендован Британской фармакопеей как агаровая среда J. Среда применяется для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов и фармацевтических образцов.

Salmonella является одним из основных возбудителей кишечных заболеваний, особенно пищевых токсикоинфекций и брюшного тифа; впервые микроорганизм был описан Эбертом в 1880 году. Среда регулярно используется для контроля присутствия контаминации Salmonella в пищевых и фармацевтических продуктах в соответствии с BP.

Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 ингибирует грамположительные бактерии. Proteus и другие грамположительные микроорганизмы также подавляются из-за повышенной концентрации цитратных и дезоксихолатных солей в среде. Восстановление цитрата железа до сульфида железа под действием H₂S вызывает характерное образование колоний с чёрным центром.

Цитратная соль в концентрации, предусмотренной рецептурой, ингибирует грамположительные бактерии и большинство других обычных кишечных микроорганизмов. Сочетание HM-пептона и HM-пептона B обеспечивает азот, минеральные вещества и витаминные факторы, необходимые для усиленного роста. Моногидрат лактозы служит источником сбраживаемого углевода.

Нейтральный красный используется как индикатор: лактозосбраживающие микроорганизмы, например колиформные бактерии, образуют розовые колонии, а неферментирующие лактозу микроорганизмы — бесцветные колонии. Salmonella образует хорошо развитые бесцветные колонии. Кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, может вызывать осаждение дезоксихолата и формирование зоны осадка вокруг колонии.

Среда обеспечивает необходимые факторы роста для нескольких ауксотрофных штаммов Salmonella Paratyphi и Typhi. Селективность среды допускает использование достаточно больших посевных доз без опасности перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 69,02 г обезвоженного порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Избегайте чрезмерного нагревания, поскольку он ухудшает свойства среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Образцы

Тип образца

Фармацевтические образцы.

Отбор и обращение с образцами

При работе с фармацевтическими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• pH после нагревания: 7,3 ± 0,2
• pH приготовленной среды: 7,10–7,50
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Температура инкубации для оценки культуральных характеристик: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации для оценки культуральных характеристик: 18–72 ч
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется красновато-оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

pH

7,10–7,50.

Испытание ростовых свойств

Испытание ростовых свойств проводят в соответствии с Британской фармакопеей (BP).

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновой агаровой среде.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Из-за различий в пищевых потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

При необходимости выделения Shigella рекомендуется применять менее ингибирующую питательную среду.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Соблюдайте установленные лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный контекст

Дезоксихолат-цитратный агар сочетает селективное ингибирование грамположительной и части нормальной кишечной микрофлоры с дифференциацией лактозосбраживающих и неферментирующих микроорганизмов по цвету колоний; для Shigella производитель указывает ограничение, связанное с ингибирующим действием среды.

Технические данные производителя