HiMedia M065-100G Дезоксихолат-цитратный агар

HiMedia·Арт.: 0048993·Арт. произв.: M065-100G

HiMedia M065-100G Дезоксихолат-цитратный агар

Name: HiMedia M065-100G Дезоксихолат-цитратный агар
Brand: HiMedia
SKU: 0048993
Price: 3664 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ3 664 руб.

Сухая питательная среда HiMedia M065-100G Дезоксихолат-цитратный агар для изоляции энтеропатогенов, в частности видов Salmonella и Shigella. Применяется для анализа клинических образцов (кал, моча) и пищевых продуктов; вес упаковки составляет 100 г.

Описание

Принцип измерения и интерпретация

Среда приготовлена по модифицированной формуле Лейфсона. Она обладает повышенной селективностью к кишечным патогенам по сравнению с обычным дезоксихолат-агаром за счёт увеличенной концентрации цитратных солей и дезоксихолата натрия.

Механизм селективности и дифференциации

Подавление микрофлоры: Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5, а также цитратные соли подавляют рост грамположительных бактерий и большинства нормальных кишечных организмов.
Источники питания: Компонент HI solids служит источником углерода и азота; его использование обеспечивает более сильное подавление колиформных бактерий, чем при использовании простого пептона или экстракта. Протеозопептон обеспечивает дополнительные витамины и минералы.
Дифференциация: Лактоза позволяет различать кишечные бациллы. Ферментирующие лактозу микроорганизмы образуют красные колонии, неферментирующие — бесцветные. Колиформные бактерии образуют розовые колонии.
Индикация: Расщепление лактозы приводит к закислению среды вокруг колоний, что меняет цвет индикатора нейтрального красного на красный. Такие колонии обычно окружены зоной помутнения из-за осаждения дезоксихолевой кислоты.
Определение H₂S: Восстановление цитрата аммония-железа (III) до сульфида железа проявляется в виде черных центров в колониях. Виды Salmonella и Shigella не ферментируют лактозу, при этом Salmonella может продуцировать H₂S, образуя бесцветные колонии с черными центрами или без них.

Методика приготовления

Суспендируйте 70,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
ВНИМАНИЕ: НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Избегайте чрезмерного нагрева, так как это вредит среде.
Охладите до 45–50 °C.
Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Примечание: Сочетание цитрата и железа (Fe) оказывает сильный гидролизующий эффект на агар при нагревании. При автоклавировании агар становится мягким, что делает невозможным посев методом штриха.

Область применения

Клинические образцы: образцы кала, образцы мочи.
Пищевые продукты: изоляция и максимальный выход патогенов групп Salmonella и Shigella.

Технические характеристики

Параметр	Значение
Происхождение	Животное
Тип продукта	Регулярный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Конечный pH (при 25 °C)	7,5 ± 0,2
Диапазон pH	7,30–7,70
Внешний вид	Гомогенный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розовато-бежевого цвета
Цвет и прозрачность готовой среды	Красно-оранжевый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
Желирование	Плотный гель, сопоставим с 1,35 % агаром

Состав (г/л)

Компонент	г/л
HI solids	10,000
Протеозопептон	10,000
Лактоза	10,000
Дезоксихолат натрия	5,000
Нейтральный красный	0,020
Цитрат натрия	20,000
Цитрат аммония-железа (III)	2,000
Агар	13,500

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выход	Цвет колонии	H₂S
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	0 %
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	слабый	20–30 %	розовые с осадком желчных солей	отрицательная реакция
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	хороший-обильный	$\ge 50$ %	бесцветные	положительная реакция, колонии с черным центром
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	хороший-обильный	$\ge 50$ %	бесцветные	положительная реакция, колонии с черным центром
Shigella flexneri ATCC 12022	50–100	хороший	40–50 %	бесцветные
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	слабый	20–30 %	розовые с осадком желчных солей	отрицательная реакция
Salmonella Abony NCTC 6017	50–100	хороший-обильный	$\ge 50$ %	бесцветные	реакция, колонии с черным центром
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923	$\ge 10^4$	подавлен	0 %

Ограничения и требования

Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
Для подтверждения вида требуется дальнейшая биохимическая идентификация.
Поверхностные колонии неферментирующих лактозу организмов могут впитывать небольшое количество красителя из среды (становиться розоватыми), что может привести к ошибочному принятию их за колиформы.
Salmonella Gallinarum подавляется, если концентрация дезоксихолата натрия составляет 0,1 % или выше.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
Утилизация: использованные или непригодные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.

Меры предосторожности

Только для профессионального использования в диагностике in vitro.
При работе с образцами следует использовать защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица, соблюдая правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.