Желчный 1,2% агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным HiMedia M049A-500G (уп/500 гр)

Питательная агаровая среда «Желчный 1,2% агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным HiMedia M049A-500G (уп/500 гр)» — диагностический агар с содержанием агара 1,2 %. Среда предназначена для селективного выделения и количественного определения колиформных бактерий в воде, молоке, молочных и других пищевых продуктах, а также для исследования клинических образцов; для окончательной идентификации необходимы дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и подсчёта коли-аэрогенов в воде, молоке и других молочных продуктах. Допускается применение для клинических образцов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение: животное

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация результатов

Желчный 1,2% агар с кристаллическим фиолетовым и нейтральным красным представляет собой модификацию исходной формулы МакКонки и применяется для подсчёта бактерий группы коли-аэрогенов.

Селективное действие основано на использовании ингибирующих компонентов — кристаллического фиолетового и желчных солей — в сочетании с индикаторной системой из лактозы и нейтрального красного. Рост многих нежелательных микроорганизмов подавляется, что позволяет проводить предварительную идентификацию целевых бактерий.

• Микроорганизмы, быстро ферментирующие лактозу, образуют пурпурные колонии, окружённые пурпурными ореолами.
• Неферментирующие лактозу или медленно ферментирующие лактозу микроорганизмы образуют бледные колонии с зеленоватыми зонами.

Пептон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов и других необходимых питательных веществ для роста. Лактоза является ферментируемым углеводом; её утилизация приводит к образованию кислот. Индикатор нейтральный красный выявляет образовавшуюся кислотность. Кристаллический фиолетовый и смесь желчных солей подавляют сопутствующую грамположительную и неспецифическую микрофлору. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Среда не является полностью специфичной для энтеробактерий: другие сопутствующие бактерии могут давать аналогичную реакцию. Для подтверждения идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Селективность среды может быть повышена культивированием в анаэробных условиях и/или при повышенной температуре — 42 °C и выше.

Среда VRBA рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) и приготовлена в соответствии с рекомендациями комитета ISO. Методика применения связана с горизонтальным методом подсчёта колиформных бактерий методом подсчёта колоний по ISO 4832:2006; требования к приготовлению, производству, хранению и оценке эффективности питательных сред приведены в ISO 11133:2014(E).

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию при перемешивании до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри, содержащие исследуемую пробу.

Типы образцов

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на данной среде.
• Каждая серия среды протестирована с микроорганизмами, указанными в сертификате анализа (COA). При использовании среды для микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований пользователя.
• Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Эффективность и оценка

Ожидаемая эффективность среды обеспечивается при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,85 % масса/объём при 25 °C.
• pH: 7,20–7,60.
• pH раствора при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Степень восстановления принимают за 100 % относительно роста бактерий на референсной среде — триптон-соевом агаре.

Селективность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Специфичность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая бутылку, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие от аналогичных сред

Селективность среды обеспечивается сочетанием кристаллического фиолетового и желчных солей, а дифференциация микроорганизмов — ферментацией лактозы с выявлением образующейся кислотности индикатором нейтральным красным; для повышения селективности допускается анаэробная инкубация и/или инкубация при температуре от 42 °C.