HiMedia M049A-100G Фиолетово-красный желчный агар (1.2%)

Питательная агаровая среда HiMedia M049A-100G «Фиолетово-красный желчный агар (1,2 %)» предназначена для селективного выделения и количественного определения коли-аэрогенных бактерий в воде, молоке и других молочных продуктах. Среда также применяется для исследования клинических образцов, а её селективность может быть повышена анаэробной инкубацией и/или инкубацией при температуре не ниже 42 °C.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и количественного определения коли-аэрогенных бактерий в:

• пробах воды;
• молоке и других молочных продуктах;
• пищевых и молочных образцах;
• клинических образцах, включая кал.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Содержание агара: 1,2 %

Принцип действия и интерпретация результатов

Фиолетово-красный желчный агар представляет собой модификацию исходной рецептуры Макконки и используется для количественного определения коли-аэрогенной группы бактерий. Принцип селективности основан на сочетании ингибирующих компонентов — кристаллического фиолетового и желчных солей — с индикаторной системой из лактозы и нейтрального красного.

Компоненты среды действуют следующим образом:

• пептон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• лактоза является сбраживаемым углеводом, утилизация которого приводит к образованию кислот;
• нейтральный красный выявляет образовавшуюся кислотность;
• кристаллический фиолетовый и смесь желчных солей подавляют сопутствующую грамположительную и неспецифическую микрофлору;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Рост многих нежелательных микроорганизмов подавляется, что позволяет предварительно идентифицировать искомые бактерии по морфологии колоний и реакции среды:

• микроорганизмы, быстро сбраживающие лактозу, образуют пурпурные колонии, окружённые пурпурными ореолами;
• микроорганизмы, не сбраживающие лактозу, или поздние сбраживатели лактозы образуют бледные колонии с зеленоватыми зонами.

Среда не является полностью специфичной для энтеробактерий: другие сопутствующие бактерии могут давать такую же реакцию. Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Фиолетово-красный желчный агар с содержанием агара 1,2 % подготовлен в соответствии с требованиями комитета ISO. Селективность среды может быть повышена при инкубации в анаэробных условиях и/или при повышенной температуре — 42 °C и выше.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при перемешивании до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри, содержащие исследуемый образец.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Пищевые и молочные образцы

Для отбора и обработки проб пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методики согласно установленным руководствам.

Пробы воды

Для отбора и обработки проб воды применяйте соответствующие методики согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

Клинические образцы

При обращении с клиническими образцами применяйте соответствующие методики согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать различную картину роста на этой среде.
• Каждая партия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
• При необходимости применения среды для микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом конкретных требований.
• Для полной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем агара концентрацией 1,2 %.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красно-фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 3,85 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Степень восстановления принимают за 100 % при росте бактерий на референсной среде — триптон-соевом агаре.

Селективность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Специфичность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик использовать продукт в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Концентрация агара в среде: 1,2 %
• Масса для приготовления 1000 мл среды: 38,53 г
• Температура разливки: 45–50 °C
• Автоклавирование: не допускается

Комплект поставки

• Питательная среда HiMedia M049A-100G, 100 г.