Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным HiMedia M049-500G (уп/500 гр)

Питательная селективная среда Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным HiMedia M049-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для выделения, обнаружения и подсчёта колиформных бактерий. Среда применяется при анализе воды, молока, молочных и пищевых продуктов, а также клинических образцов; для полной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для селективного выделения, обнаружения и количественного определения коли-аэрогенезных бактерий в:

• воде;
• молоке и других молочных продуктах;
• пищевых продуктах;
• клинических образцах, включая кал.

Состав и показатели эффективности среды соответствуют требованиям ISO 4832:2010 и ISO 11133:2014, поправка 2:2020.

Состав

Среда соответствует составу кристалвиолет-нейтральный красный-жёлчный лактозный агар (VRBL).

Формула среды M049 — желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным показателям эффективности.

* Пептон эквивалентен ферментативному перевару тканей животного происхождения.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 41,53 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Немедленно разлейте среду в стерильные чашки Петри, содержащие инокулят.
6. При необходимости среду можно стерилизовать в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Колиформная группа включает несколько родов бактерий семейства Enterobacteriaceae. Исторически определение этой группы основывалось на способности ферментировать лактозу. Колиформные бактерии определяются как аэробные и факультативно-анаэробные грамотрицательные неспорообразующие палочковидные бактерии, ферментирующие лактозу с образованием кислоты и газа в течение 48 ч при 35 °C.

Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным представляет собой модификацию исходной рецептуры МакКонки и используется для количественного определения коли-аэрогенезной группы бактерий. Селективное действие обеспечивается кристаллическим фиолетовым и жёлчными солями, а дифференциация — системой лактоза/нейтральный красный.

• Рост многих нежелательных микроорганизмов подавляется селективными компонентами.
• Микроорганизмы, быстро ферментирующие лактозу, образуют пурпурные колонии, окружённые пурпурными ореолами.
• Неферментирующие лактозу микроорганизмы или поздние ферментаторы образуют бледные колонии с зеленоватыми зонами.
• Селективность среды можно повысить инкубацией в анаэробных условиях и/или при повышенной температуре — 42 °C и выше.
• Пептон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов и других необходимых питательных веществ.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом; её утилизация приводит к образованию кислот.
• Индикатор нейтральный красный выявляет образующуюся кислотность.
• Кристаллический фиолетовый и смесь жёлчных солей подавляют сопутствующую грамположительную и неспецифическую микрофлору.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным не является полностью специфичным для энтеробактерий: другие сопутствующие бактерии могут давать такую же реакцию. Для положительной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Типы образцов и обращение с ними

Для пищевых и молочных образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим рекомендациям.

Клинические образцы:

• кал.

Пищевые и молочные образцы:

• молоко;
• молочные продукты;
• другие пищевые продукты.

Водные образцы:

• вода.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-пурпурного цвета.

Реакция и pH

Реакция: для 4,15%-ного водного раствора массой/объёмом при 25 °C.

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Продуктивность: культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Коэффициент восстановления принимают за 100 % при росте бактерий на референтной среде — триптиказо-соевом агаре.

Селективность: культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Специфичность: культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой среды: при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 20–30 °C.
• Использование: до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия ёмкость необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом виде.
• Среда гигроскопична; при неправильном хранении возможно образование комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо герметично закрывать.
• Показатели эффективности среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать различные характеристики роста на этой среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется провести валидацию с учётом специфических требований пользователя.
3. Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.
4. Среда не обладает полной специфичностью к энтеробактериям: сопутствующие бактерии могут давать аналогичную реакцию.

Меры безопасности

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения.

При работе необходимо:

• ознакомиться с маркировкой до вскрытия контейнера;
• использовать защитные перчатки;
• использовать защитную одежду;
• применять средства защиты глаз и лица;
• соблюдать правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами;
• соблюдать стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами;
• руководствоваться требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

| Парамет